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Tissu
Embryon
Maladie
Normal
Site métastatique
Embryon (stade de fermeture dorsale)
Synonymes
KC, K C

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KC

Cell line · Référence du produit 300604

KC (Kc167) est une lignée cellulaire embryonnaire de Drosophila melanogaster issue d'un embryon femelle au stade de la fermeture dorsale. Cette lignée a été initialement établie et a…

€777.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

Fabriqué sur commande
1

01Informations générales

Description

KC (Kc167) est une lignée cellulaire embryonnaire de Drosophila melanogaster issue d'un embryon femelle au stade de la fermeture dorsale. Cette lignée a été initialement établie et est largement utilisée en biologie cellulaire de la drosophile, dans les criblages génétiques et en génomique fonctionnelle. Les cellules Kc167 ont été immortalisées à l'aide du virus SV40 et se développent en semi-adhérence, formant une population mixte de cellules fixées et de cellules flottant librement. Elles comptent parmi les lignées cellulaires de Drosophila les mieux caractérisées et se prêtent parfaitement au silençage génique par ARNi, ce qui en fait un modèle de référence pour les criblages par ARNi à l'échelle du génome en biologie des invertébrés.

Les cellules KC sont utilisables en biologie cellulaire de la drosophile, pour les criblages par ARNi et CRISPR à l’échelle du génome, les études sur les voies de transduction de signaux (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), la recherche sur l’immunité innée et les études comparatives des voies conservées au cours de l’évolution. Le génome de la drosophile, entièrement séquencé et annoté, associé à de vastes bases de données publiques de réactifs d’ARNi (par exemple, DRSC/TRiP), confère aux cellules KC un potentiel particulièrement puissant pour la découverte génomique fonctionnelle sans biais. En raison de l’immortalisation par le SV40, ces cellules sont classées au niveau BSL-2.

Tissu
Embryon
Maladie
Normal
Site métastatique
Embryon (stade de fermeture dorsale)
Applications
Biologie cellulaire de la drosophile ; criblages par ARNi à l'échelle du génome ; criblages CRISPR ; transduction du signal (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB) ; immunité innée ; génomique fonctionnelle des invertébrés
Synonymes
  • KC
  • K C

02Classification

Organisme
Mouche des fruits
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
GMO-S2
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S2: This Drosophila cell line contains a stably integrated SV40 immortalization cassette. BSL-2 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Niveau de biosécurité
2

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial semi-adhérent
Type de cellule
Cellules embryonnaires
Temps de doublement
environ 24 à 48 heures

04Identifiants

Référence
KC (référence Cytion 300604)
Numéro d'identification fiscale NCBI
7227
Cellosaurus
CVCL_Z833

05Expression et sensibilité

Sensibilité aux virus
SV40 immortalisé

06Manipulation et culture

Milieu de culture
Milieu Schneider pour drosophile + 2 mM de glutamine + 10 % de sérum fœtal bovin (FBS).
Atmosphère d'incubation

25 °C, air ambiant (pas besoin de CO₂).

Compléments alimentaires
Ajouter au milieu 2 mM de glutamine et 10 % de sérum fœtal bovin (FBS)
Réactif de dissociation
Non nécessaire (légèrement aggloméré ; remettre délicatement en suspension)
Repiquage
Pipeter délicatement la culture pour remettre en suspension les cellules semi-adhérentes. Transférer un volume approprié dans un nouveau flacon et ajouter du milieu de Schneider frais préchauffé. Diluer jusqu’à une densité comprise entre 5 × 10⁵ et 1 × 10⁶ cellules/ml. Incuber à 25 °C à l’air ambiant, sans CO₂.
Rapport de fractionnement
1 à 3
Densité de semis
5 × 10⁵ à 1 × 10⁶ cellules/ml
Renouvellement des fluides
Tous les 2 ou 3 jours
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
Phase de fermeture dorsale