Gå direkte til indholdet
Væv
Embryo
Sygdom
Normal
Metastasested
Embryo (dorsal lukningsfase)
Synonymer
KC, K C

Dokumenter

KC

Cell line · Varenummer 300604

KC (Kc167) er en embryonale cellelinje fra Drosophila melanogaster, der stammer fra et hunembryo i dorsal lukningsfasen. Linjen blev oprindeligt etableret og har...

€777.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

Fremstillet på bestilling
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

KC (Kc167) er en embryonal cellelinje fra Drosophila melanogaster, der stammer fra et hunembryo i dorsal lukningsfasen. Linjen blev oprindeligt etableret og har været udbredt anvendt inden for Drosophila-cellebiologi, genetiske screenings og funktionel genomik. Kc167-celler er blevet gjort udødelige med SV40 og vokser semi-adhærent, hvorved de danner en blandet population af fastsiddende og løst svævende celler. De hører til de bedst karakteriserede Drosophila-cellelinjer og er fuldt ud egnede til RNAi-medieret gensilencing, hvilket gør dem til en hjørnesten i genomomfattende RNAi-screeninger inden for hvirvelløse dyrs biologi.

KC-celler kan anvendes inden for Drosophila-cellebiologi, genomomfattende RNAi- og CRISPR-screeninger, undersøgelser af signaltransduktionsveje (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), forskning i medfødt immunitet samt sammenlignende studier af evolutionært bevarede signalveje. Det fuldt sekventerede og annoterede Drosophila-genom kombineret med omfattende offentlige databaser over RNAi-reagenser (f.eks. DRSC/TRiP) gør KC-celler særligt velegnede til objektiv funktionel genomforskning. Der gælder BSL-2-klassificering på grund af SV40-immortaliseringen.

Væv
Embryo
Sygdom
Normal
Metastasested
Embryo (dorsal lukningsfase)
Anvendelser
Drosophila-cellebiologi; genomomfattende RNAi-screeninger; CRISPR-screeninger; signaltransduktion (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); medfødt immunitet; funktionel genomik hos hvirvelløse dyr
Synonymer
  • KC
  • K C

02Klassificering

Organisme
Frugtflue
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S2
Oplysninger om GMO-status
GMO-S2: This Drosophila cell line contains a stably integrated SV40 immortalization cassette. BSL-2 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
2

03Egenskaber

Morfologi
Halvfastsiddende, epitelagtig
Celletype
Embryonale celler
Fordoblingstid
ca. 24 til 48 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
KC (Cytion-katalognummer 300604)
NCBI-skattenummer
7227
Cellosaurus
CVCL_Z833

05Udtryk og modtagelighed

Virusfølsomhed
SV40 gjort udødelig

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
Schneiders Drosophila-medium + 2 mM glutamin + 10 % føtal bovint serum (FBS).
Inkubationsatmosfære

25 °C, omgivende luft (ingen CO₂ påkrævet).

Kosttilskud
Tilsæt 2 mM glutamin og 10 % FBS til mediet
Dissociationsreagens
Ikke påkrævet (halvfast; resuspenderes forsigtigt)
Oddyrkning
Pipetter forsigtigt kulturen for at resuspendere de halvt vedhæftede celler. Overfør et passende volumen til en ny kolbe, og tilsæt frisk, forvarmet Schneider-medium. Fortynd til en tæthed på 5 × 10⁵ til 1 × 10⁶ celler/ml. Inkuber ved 25 °C i omgivende luft uden CO₂.
Opdelingsforhold
1 til 3
Såtæthed
5 × 10⁵ til 1 × 10⁶ celler/ml
Væskeudskiftning
Hver 2. til 3. dag
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
Fasen med lukning af ryggen