Přejít na obsah
Tkáň
Embrya
Nemoc
Normální
Místo metastázy
Embryo (stadium uzavření hřbetní štěrbiny)
Synonyma
KC, K C

Dokumenty

KC

Cell line · Číslo výrobku 300604

KC (Kc167) je embryonální buněčná linie Drosophila melanogaster odvozená z samiččího embrya ve stadiu dorzálního uzavření. Tato linie byla původně založena a...

€777.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Na zakázku
1

01Obecné informace

Popis

KC (Kc167) je embryonální buněčná linie Drosophila melanogaster odvozená z samičího embrya ve stadiu dorzálního uzavření. Tato linie byla původně založena a je široce využívána v buněčné biologii Drosophila, při genetických screeninzích a ve funkční genomice. Buňky Kc167 byly imortalizovány pomocí SV40 a rostou poloadhezivně, přičemž tvoří smíšenou populaci přilnutých a volně plovoucích buněk. Patří mezi nejlépe charakterizované buněčné linie Drosophila a jsou plně vhodné pro potlačení genů zprostředkované RNAi, což z nich činí základní model pro celogenomové screeningy RNAi v biologii bezobratlých.

Buňky KC jsou použitelné v buněčné biologii Drosophila, při genomových skríningech pomocí RNAi a CRISPR, ve studiích signálních transdukčních drah (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), ve výzkumu vrozené imunity a v komparativních studiích evolučně konzervovaných drah. Díky plně sekvenovanému a anotovanému genomu Drosophila v kombinaci s rozsáhlými veřejnými databázemi reagencií pro RNAi (např. DRSC/TRiP) jsou buňky KC obzvláště účinné pro nestranné objevy v oblasti funkční genomiky. Vzhledem k imortalizaci virem SV40 se na ně vztahuje klasifikace BSL-2.

Tkáň
Embrya
Nemoc
Normální
Místo metastázy
Embryo (stadium uzavření hřbetní štěrbiny)
Aplikace
Buněčná biologie Drosophila; celogenomové screeningy pomocí RNAi; screeningy pomocí CRISPR; signální transdukce (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); vrozená imunita; funkční genomika bezobratlých
Synonyma
  • KC
  • K C

02Klasifikace

Organismus
Ovocná muška
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S2
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S2: This Drosophila cell line contains a stably integrated SV40 immortalization cassette. BSL-2 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
2

03Charakteristika

Morfologie
Částečně adhezivní, epiteliální typu
Typ buňky
Embryonální buňky
Doba zdvojnásobení
přibližně 24 až 48 hodin

04Identifikátory

Citace
KC (katalogové číslo Cytion 300604)
Daňové identifikační číslo NCBI
7227
Cellosaurus
CVCL_Z833

05Exprese a náchylnost

Náchylnost k virům
SV40 – virus způsobující nesmrteľnost buněk

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
Schneiderovo médium pro Drosophila + 2 mM glutamin + 10 % fetálního bovinního séra (FBS).
Inkubační atmosféra

25 °C, okolní vzduch (není třeba CO₂).

Doplňky stravy
Do živného média přidejte 2 mM glutaminu a 10 % FBS
Disociační činidlo
Není nutné (částečně ulpívající; jemně resuspendujte)
Subkultivace
Jemně pipetujte kulturu, abyste resuspendovali částečně adhezivní buňky. Přemístěte odpovídající objem do nové baňky a přidejte čerstvé, předem zahřáté Schneiderovo médium. Nařeďte na hustotu 5 × 10⁵ až 1 × 10⁶ buněk/ml. Inkubujte při teplotě 25 °C na vzduchu bez CO₂.
Poměr rozdělení
1 až 3
Hustota výsevu
5 × 10⁵ až 1 × 10⁶ buněk/ml
Obnova tekutin
Každé 2 až 3 dny
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
Fáze uzavření hřbetní části