Μετάβαση στο περιεχόμενο
Ιστός
Έμβρυο
Ασθένεια
Κανονικό
Θέση μετάστασης
Έμβρυο (στάδιο ραφής της ραχιαίας πλευράς)
Συνώνυμα
KC, K C

Έγγραφα

KC

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300604

Η KC (Kc167) είναι μια εμβρυϊκή κυτταρική σειρά της Drosophila melanogaster που προέρχεται από θηλυκό έμβρυο στο στάδιο της ραφής της ραχιαίας πλευράς. Η σειρά δημιουργήθηκε αρχικά και έχει...

€777.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Κατασκευάζεται κατόπιν παραγγελίας
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η KC (Kc167) είναι μια εμβρυϊκή κυτταρική σειρά της Drosophila melanogaster που προέρχεται από θηλυκό έμβρυο στο στάδιο της ραχιαίας σύγκλεισης. Η σειρά αυτή δημιουργήθηκε αρχικά και έχει χρησιμοποιηθεί ευρέως στη κυτταρική βιολογία της Drosophila, σε γενετικές αναλύσεις και στη λειτουργική γονιδιωματική. Τα κύτταρα Kc167 έχουν αθανατοποιηθεί με τον ιό SV40 και αναπτύσσονται ημι-προσκολλητικά, σχηματίζοντας έναν μικτό πληθυσμό προσκολλημένων και χαλαρά αιωρούμενων κυττάρων. Ανήκουν στις καλύτερα χαρακτηρισμένες κυτταρικές σειρές της Drosophila και ανταποκρίνονται πλήρως στη γονιδιακή σίγηση που προκαλείται από RNAi, γεγονός που τις καθιστά βασικό μοντέλο για διαγονιδιακές αναζητήσεις RNAi στη βιολογία των ασπόνδυλων.

Τα κύτταρα KC μπορούν να χρησιμοποιηθούν στη κυτταρική βιολογία της Drosophila, σε διαγονιδιακές διαλογές RNAi και CRISPR, σε μελέτες οδών μεταγωγής σήματος (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), στην έρευνα της έμφυτης ανοσίας και σε συγκριτικές μελέτες εξελικτικά συντηρημένων οδών. Το πλήρως αλληλουχημένο και σχολιασμένο γονιδίωμα της Drosophila, σε συνδυασμό με εκτενείς δημόσιες βάσεις δεδομένων αντιδραστηρίων RNAi (π.χ., DRSC/TRiP), καθιστά τα κύτταρα KC ιδιαίτερα ισχυρά για την αμερόληπτη λειτουργική γονιδιωματική ανακάλυψη. Ισχύει η ταξινόμηση BSL-2 λόγω της αθανατοποίησης με τον ιό SV40.

Ιστός
Έμβρυο
Ασθένεια
Κανονικό
Θέση μετάστασης
Έμβρυο (στάδιο ραφής της ραχιαίας πλευράς)
Εφαρμογές
Κυτταρική βιολογία της Drosophila· έρευνες RNAi σε επίπεδο γονιδιώματος· έρευνες CRISPR· μεταγωγή σήματος (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB)· έμφυτη ανοσία· λειτουργική γονιδιωματική των ασπόνδυλων
Συνώνυμα
  • KC
  • K C

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Μύγα των φρούτων
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
GMO-S2
Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
GMO-S2: This Drosophila cell line contains a stably integrated SV40 immortalization cassette. BSL-2 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Επίπεδο βιοασφάλειας
2

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Ημι-προσκολλητικό, επιθηλιακού τύπου
Τύπος κυττάρου
Εμβρυϊκά κύτταρα
Χρόνος διπλασιασμού
περίπου 24 έως 48 ώρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
KC (αριθμός καταλόγου Cytion 300604)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
7227
Κελλοσαύρος
CVCL_Z833

05Έκφραση και ευαισθησία

Ευαισθησία στον ιό
Αθανατοποιημένος SV40

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
Μέσο Schneider για τη Drosophila + 2 mM γλουταμίνη + 10% εμβρυϊκό βοοειδές ορό (FBS).
Ατμόσφαιρα επώασης

25 °C, ατμοσφαιρικός αέρας (δεν απαιτείται CO₂).

Συμπληρώματα
Προσθέστε στο μέσο 2 mM γλουταμίνη και 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Δεν απαιτείται (ημι-συγκολλητικό· ανακατέψτε απαλά)
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Με προσοχή, αναδεύστε την καλλιέργεια με πιπέτα για να επαναδιαλύσετε τα ημι-προσκολλημένα κύτταρα. Μεταφέρετε τον κατάλληλο όγκο σε νέα φιάλη και προσθέστε φρέσκο, προθερμασμένο μέσο Schneider. Αραιώστε έως πυκνότητα 5 × 10⁵ έως 1 × 10⁶ κύτταρα/ml. Επωάστε στους 25 °C σε ατμοσφαιρικό αέρα χωρίς CO₂.
Αναλογία διαχωρισμού
1 έως 3
Πυκνότητα σποράς
5 × 10⁵ έως 1 × 10⁶ κύτταρα/ml
Ανανέωση υγρών
Κάθε 2 έως 3 ημέρες
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
Στάδιο κλεισίματος της ραχιαίας πλευράς