İçeriğe atla
Doku
Embriyo
Hastalık
Normal
Metastaz yeri
Embriyo (sırt kapanması aşaması)
Eş anlamlılar
KC, K C

KC

Cell line · Ürün numarası 300604

KC (Kc167), dorsal kapanma aşamasındaki bir dişi embriyodan elde edilen bir Drosophila melanogaster embriyonik hücre hattıdır. Bu hücre hattı ilk olarak oluşturulmuş ve...

€777.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Sipariş üzerine üretilir
1

01Genel bilgiler

Açıklama

KC (Kc167), dorsal kapanma aşamasındaki bir dişi embriyodan elde edilen bir Drosophila melanogaster embriyonik hücre hattıdır. Bu hücre hattı ilk olarak oluşturulmuş olup, Drosophila hücre biyolojisi, genetik taramalar ve fonksiyonel genomik alanlarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Kc167 hücreleri SV40 ile ölümsüzleştirilmiştir ve yarı yapışkan bir şekilde büyürler; bu da yapışık ve gevşek bir şekilde yüzen hücrelerden oluşan karışık bir popülasyon oluşturur. Bu hücreler, en iyi karakterize edilmiş Drosophila hücre hatları arasında yer alır ve RNAi aracılı gen susturmaya tamamen uygundur; bu da onları omurgasız biyolojisinde genom çapında RNAi taramaları için temel bir model haline getirir.

KC hücreleri, Drosophila hücre biyolojisi, genom çapında RNAi ve CRISPR taramaları, sinyal iletim yolu çalışmaları (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), doğuştan gelen bağışıklık araştırmaları ve evrimsel olarak korunmuş yolakların karşılaştırmalı çalışmalarında kullanılabilir. Tamamen dizilenmiş ve anotlanmış Drosophila genomu, RNAi reaktiflerinin kapsamlı kamuya açık veritabanlarıyla (örn. DRSC/TRiP) birleştiğinde, KC hücrelerini tarafsız fonksiyonel genomik keşifler için özellikle güçlü kılar. SV40 ile ölümsüzleştirme nedeniyle BSL-2 sınıflandırması geçerlidir.

Doku
Embriyo
Hastalık
Normal
Metastaz yeri
Embriyo (sırt kapanması aşaması)
Uygulamalar
Drosophila hücre biyolojisi; genom çapında RNAi taramaları; CRISPR taramaları; sinyal iletimi (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); doğuştan gelen bağışıklık; omurgasızlarda fonksiyonel genomik
Eş anlamlılar
  • KC
  • K C

02Sınıflandırma

Canlı
Meyve sineği
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S2
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S2: This Drosophila cell line contains a stably integrated SV40 immortalization cassette. BSL-2 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
2

03Özellikler

Morfoloji
Yarı yapışkan, epitel benzeri
Hücre türü
Embriyonik hücreler
İki katına çıkma süresi
yaklaşık 24 ila 48 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
KC (Cytion katalog numarası 300604)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
7227
Cellosaurus
CVCL_Z833

05İfade ve duyarlılık

Virüse karşı duyarlılık
SV40'ın ölümsüzleştirilmesi

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
Schneider'in Drosophila besiyeri + 2 mM glutamin + %10 fetal sığır serumu (FBS).
Kuluçka ortamı

25 °C, ortam havası (CO₂ gerekmez).

Takviyeler
Besiyerine 2 mM glutamin ve %10 FBS ekleyin
Ayrıştırma reaktifi
Gerekli değildir (yarı yapışkan; nazikçe yeniden süspansiyon haline getirin)
Alt kültür oluşturma
Yarı yapışık hücreleri yeniden süspansiyon haline getirmek için kültürü nazikçe pipetleyin. Uygun bir hacmi yeni bir şişeye aktarın ve önceden ısıtılmış taze Schneider besiyerini ekleyin. Hücre yoğunluğunu 5 × 10⁵ ila 1 × 10⁶ hücre/ml olacak şekilde seyreltin. CO₂ içermeyen ortam havasında 25°C'de inkübe edin.
Bölünme oranı
1'den 3'e kadar
Ekim yoğunluğu
5 × 10⁵ ila 1 × 10⁶ hücre/ml
Sıvı değişimi
Her 2 ila 3 günde bir
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
Sırt kapanma aşaması