Prejsť na obsah
Tkanivo
Embryo
Choroba
Normálne
Miesto metastáz
Embryo (štádium uzatvárania chrbtovej steny)
Synonymá
KC, K C

Dokumenty

KC

Cell line · Číslo výrobku 300604

KC (Kc167) je embryonálna bunková línia Drosophila melanogaster odvodená z samičieho embrya vo štádiu dorzálneho uzatvárania. Táto línia bola pôvodne založená a má...

€777.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na objednávku
1

01Všeobecné informácie

Popis

KC (Kc167) je embryonálna bunková línia Drosophila melanogaster odvodená zo samčieho embrya vo štádiu dorzálneho uzatvorenia. Táto línia bola pôvodne založená a široko sa využíva v bunkovej biológii Drosophila, genetických skríningoch a funkčnej genomike. Bunky Kc167 boli imortalizované vírusom SV40 a rastú poloadherenčne, pričom tvoria zmiešanú populáciu pripojených a voľne plávajúcich buniek. Patria medzi najlepšie charakterizované bunkové línie Drosophila a sú plne vhodné na génové umlčanie sprostredkované RNAi, čo z nich robí základný model pre celogenómové skríningy RNAi v biológii bezstavovcov.

Bunky KC sa dajú využiť v bunkovej biológii Drosophila, pri celogenómových skríningoch pomocou RNAi a CRISPR, pri štúdiách signálnych transdukčných dráh (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), vo výskume vrodenej imunity a v komparatívnych štúdiách evolučne konzervovaných dráh. Úplne sekvenovaný a anotovaný genóm Drosophila v kombinácii s rozsiahlymi verejnými databázami RNAi reagencií (napr. DRSC/TRiP) robí z buniek KC mimoriadne výkonný nástroj na objektívne funkčné genomické objavy. Vzhľadom na imortalizáciu vírusom SV40 sa na ne vzťahuje klasifikácia BSL-2.

Tkanivo
Embryo
Choroba
Normálne
Miesto metastáz
Embryo (štádium uzatvárania chrbtovej steny)
Aplikácie
Bunka biológia Drosophila; celogenómové skríningy pomocou RNAi; skríningy pomocou CRISPR; signálna transdukcia (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); vrodená imunita; funkčná genomika bezstavovcov
Synonymá
  • KC
  • K C

02Klasifikácia

Organizmus
Ovocná muška
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO-S2
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S2: This Drosophila cell line contains a stably integrated SV40 immortalization cassette. BSL-2 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
2

03Charakteristiky

Morfológia
Čiastočne priliehavý, epitelový typ
Typ bunky
Embryonálne bunky
Doba zdvojnásobenia
približne 24 až 48 hodín

04Identifikátory

Citácia
KC (katalógové číslo Cytion 300604)
Daňové identifikačné číslo NCBI
7227
Cellosaurus
CVCL_Z833

05Prejav a náchylnosť

Náchylnosť na vírusy
SV40 – vírus spôsobujúci nesmrteľnosť

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
Schneiderovo médium pre Drosophila + 2 mM glutamín + 10 % fetálneho bovinného séra (FBS).
Inkubačná atmosféra

25 °C, okolité ovzdušie (nie je potrebný CO₂).

Doplnky stravy
Do živného média pridajte 2 mM glutamínu a 10 % FBS
Disociačné činidlo
Nie je potrebné (čiastočne prilnuté; jemne resuspendujte)
Rozmnožovanie kultúr
Jemne pipetujte kultúru, aby sa čiastočne adhezívne bunky opäť suspendovali. Preneste primeraný objem do novej fľaše a pridajte čerstvé, vopred zahriate Schneiderovo médium. Zrieďte na hustotu 5 × 10⁵ až 1 × 10⁶ buniek/ml. Inkubujte pri teplote 25 °C na vzduchu bez CO₂.
Pomer rozdelenia
1 až 3
Hustota výsevu
5 × 10⁵ až 1 × 10⁶ buniek/ml
Obnova kvapaliny
Každé 2 až 3 dni
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
Fáza uzatvárania chrbtovej časti