Ga naar de inhoud
Weefsel
Embryo
Ziekte
Normaal
Plaats van uitzaaiingen
Embryo (stadium van dorsale sluiting)
Synoniemen
KC, K C

Documenten

KC

Cell line · Productnummer 300604

KC (Kc167) is een embryonale cellijn van Drosophila melanogaster die is afgeleid van een vrouwelijk embryo in het stadium van dorsale sluiting. De lijn is oorspronkelijk opgezet en heeft...

€777.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op bestelling gemaakt
1

01Algemene informatie

Beschrijving

KC (Kc167) is een embryonale cellijn van Drosophila melanogaster die is afgeleid van een vrouwelijk embryo in het stadium van dorsale sluiting. De lijn is oorspronkelijk opgezet en wordt op grote schaal gebruikt in de celbiologie van Drosophila, bij genetische screens en in de functionele genomica. Kc167-cellen zijn geïmmortaliseerd met SV40 en groeien semi-adherent, waarbij ze een gemengde populatie vormen van gehechte en los zwevende cellen. Ze behoren tot de best gekarakteriseerde Drosophila-cellijnen en lenen zich uitstekend voor RNAi-gemedieerde genuitschakeling, waardoor ze een hoeksteen vormen voor genoombrede RNAi-screenings in de biologie van ongewervelde dieren.

KC-cellen zijn toepasbaar in de Drosophila-celbiologie, genoombrede RNAi- en CRISPR-screens, onderzoek naar signaaltransductieroutes (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), onderzoek naar de aangeboren immuniteit en vergelijkende studies van evolutionair geconserveerde routes. Het volledig gesequenteerde en geannoteerde Drosophila-genoom, in combinatie met uitgebreide openbare databases van RNAi-reagentia (bijv. DRSC/TRiP), maakt KC-cellen bijzonder krachtig voor onbevooroordeelde functionele genomische ontdekkingen. Vanwege de SV40-immortalisatie geldt de BSL-2-classificatie.

Weefsel
Embryo
Ziekte
Normaal
Plaats van uitzaaiingen
Embryo (stadium van dorsale sluiting)
Toepassingen
Celbiologie van Drosophila; genoombrede RNAi-screens; CRISPR-screens; signaaltransductie (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); aangeboren immuniteit; functionele genomica bij ongewervelden
Synoniemen
  • KC
  • K C

02Classificatie

Organisme
Fruitvlieg
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S2
Details over de GGO-status
GMO-S2: This Drosophila cell line contains a stably integrated SV40 immortalization cassette. BSL-2 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
2

03Kenmerken

Morfologie
Semi-adherent, epitheelachtig
Celtype
Embryonale cellen
Verdubbelingstijd
ongeveer 24 tot 48 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
KC (Cytion-catalogusnummer 300604)
NCBI-belastingnummer
7227
Cellosaurus
CVCL_Z833

05Expressie en vatbaarheid

Gevoeligheid voor virussen
SV40-virus dat cellen onsterfelijk maakt

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
Schneider-medium voor Drosophila + 2 mM glutamine + 10% foetaal runderserum (FBS).
Incubatieomgeving

25 °C, omgevingslucht (geen CO₂ nodig).

Supplementen
Voeg aan het medium 2 mM glutamine en 10% FBS toe
Dissociatiereagens
Niet vereist (halfvast; voorzichtig opnieuw in suspensie brengen)
Heruitplanten
Pipetteer de kweek voorzichtig om de halfhechtende cellen weer in suspensie te brengen. Breng een geschikt volume over naar een nieuwe kolf en voeg vers, voorverwarmd Schneider-medium toe. Verdun tot een dichtheid van 5 × 10⁵ tot 1 × 10⁶ cellen/ml. Incubeer bij 25 °C in omgevingslucht zonder CO₂.
Splitsingsverhouding
1 tot en met 3
Zaaidichtheid
5 × 10⁵ tot 1 × 10⁶ cellen/ml
Vloeistofverversing
Om de 2 tot 3 dagen
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
Fase van de dorsale sluiting