KC

A KC (Kc167) é uma linha celular embrionária de Drosophila melanogaster derivada de um embrião feminino na fase de fecho dorsal. A linha foi originalmente estabelecida e tem sido amplamente utilizada na biologia celular da Drosophila, em crivagens genéticas e na genómica funcional. As células Kc167 foram imortalizadas com SV40 e crescem de forma semi-aderente, formando uma população mista de células aderentes e flutuantes. Estão entre as linhas celulares de Drosophila mais bem caracterizadas e são totalmente suscetíveis ao silenciamento génico mediado por RNAi, o que as torna um modelo fundamental para triagens de RNAi ao nível do genoma na biologia dos invertebrados.

As células KC são aplicáveis na biologia celular da Drosophila, em triagens de RNAi e CRISPR ao nível do genoma, em estudos de vias de transdução de sinal (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), na investigação da imunidade inata e em estudos comparativos de vias conservadas evolutivamente. O genoma da Drosophila, totalmente sequenciado e anotado, combinado com extensas bases de dados públicas de reagentes de RNAi (por exemplo, DRSC/TRiP), torna as células KC particularmente poderosas para a descoberta genómica funcional imparcial. Aplica-se a classificação BSL-2 devido à imortalização por SV40.

25 °C, ar ambiente (não é necessário CO₂).

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia