Pereiti prie turinio
Audinys
Embrionas
Liga
Normalus
Metastazių vieta
Embrionas (nugaros užsidarymo stadija)
Sinonimai
KC, K C

Dokumentai

KC

Cell line · Prekės numeris 300604

KC (Kc167) – tai „Drosophila melanogaster“ embrioninė ląstelių linija, gauta iš patelės embriono, esant nugaros užsidarymo stadijai. Ši linija buvo iš pradžių sukurta ir...

€777.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Pagaminta pagal užsakymą
1

01Bendra informacija

Aprašymas

KC (Kc167) – tai „Drosophila melanogaster“ embrioninė ląstelių linija, gauta iš patelės embriono, esant nugaros užsidarymo stadijai. Ši linija buvo sukurta anksčiau ir plačiai naudojama „Drosophila“ ląstelių biologijoje, genetiniuose tyrimuose bei funkcinėje genomikoje. Kc167 ląstelės buvo imortalizuotos naudojant SV40 ir auga pusiau adhezyviai, sudarančios mišrią prisitvirtinusių ir laisvai plūduriuojančių ląstelių populiaciją. Jos yra vienos iš geriausiai apibūdintų „Drosophila“ ląstelių linijų ir puikiai tinka RNRi tarpininkaujamam genų nutildymui, todėl yra pagrindinis modelis genomo masto RNRi atrankoms bestuburių biologijoje.

KC ląstelės tinka naudoti „Drosophila“ ląstelių biologijoje, visą genomą apimančiuose RNAi ir CRISPR tyrimuose, signalų perdavimo kelių tyrimuose (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), įgimto imuniteto tyrimuose ir evoliuciškai išlikusių kelių lyginamuosiuose tyrimuose. Visiškai sekvenuotas ir anotuotas „Drosophila“ genomas, kartu su išsamiomis viešomis RNAi reagentų duomenų bazėmis (pvz., DRSC/TRiP), daro KC ląsteles ypač galingą įrankį nešališkiems funkcinių genomų atradimams. Dėl SV40 imortalizacijos joms taikoma BSL-2 klasifikacija.

Audinys
Embrionas
Liga
Normalus
Metastazių vieta
Embrionas (nugaros užsidarymo stadija)
Paraiškos
„Drosophila“ ląstelių biologija; visą genomą apimantys RNRi tyrimai; CRISPR tyrimai; signalų perdavimas (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); įgimtas imunitetas; bestuburių funkcinė genomika
Sinonimai
  • KC
  • K C

02Klasifikacija

Organizmas
Vaisinė musė
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S2
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S2: This Drosophila cell line contains a stably integrated SV40 immortalization cassette. BSL-2 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
2

03Charakteristikos

Morfologija
Pusiau prilipęs, epitelio tipo
Ląstelių tipas
Embrioninės ląstelės
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
maždaug nuo 24 iki 48 valandų

04Identifikatoriai

Nuoroda
KC (Cytion katalogo numeris 300604)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
7227
Cellosaurus
CVCL_Z833

05Išraiška ir jautrumas

Jautrumas virusams
SV40, įgijęs nemirtingumą

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
Schneiderio Drosophila terpė + 2 mM glutaminas + 10 % veršelių serumo (FBS).
Inkubacijos aplinka

25 °C, aplinkos oro temperatūra (CO₂ nereikia).

Maisto papildai
Į terpę įpilkite 2 mM glutamino ir 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Nereikalinga (pusiau prilipusi; atsargiai išmaišykite)
Subkultūrinis auginimas
Švelniai pipetuokite kultūrą, kad vėl suspenduotumėte pusiau prilipusias ląsteles. Perkelkite reikiamą tūrį į naują kolbą ir įpilkite šviežios, iš anksto pašildytos Schneiderio terpės. Praskieskite iki tankio nuo 5 × 10⁵ iki 1 × 10⁶ ląstelių/ml. Inkubuokite 25 °C temperatūroje aplinkos ore be CO₂.
Skaidymo santykis
1–3
Sėjos tankis
nuo 5 × 10⁵ iki 1 × 10⁶ ląstelių/ml
Skysčių atnaujinimas
Kas 2-3 dienas
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
Nugaros užsidarymo etapas