Mine otse sisu juurde
Kude
Embrüo
Haigus
Tavaline
Metastaaside asukoht
Embrüo (seljaosa sulgumise etapp)
Sünonüümid
KC, K C

Dokumendid

KC

Cell line · Toote number 300604

KC (Kc167) on Drosophila melanogasteri embrüonaalne rakuliin, mis on saadud seljaosa sulgumisstaadiumis oleva emase embrüo rakkudest. See liin loodi algselt ja on...

€777.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Tellimusel valmistatud
1

01Üldine teave

Kirjeldus

KC (Kc167) on Drosophila melanogaster’i embrüonaalne rakuliin, mis on saadud seljaosa sulgumisstaadiumis oleva emase embrüo rakkudest. See liin loodi algselt ja seda on laialdaselt kasutatud Drosophila rakubioloogias, geneetilistes sõelumistes ja funktsionaalses genoomikas. Kc167 rakud on SV40 abil immortaliseeritud ja kasvavad poolkinnitunult, moodustades segapopulatsiooni kinnitunud ja vabalt ujuvatest rakkudest. Need kuuluvad kõige paremini iseloomustatud Drosophila rakuliinide hulka ja alluvad täielikult RNAi-vahendatud geenide vaigistamisele, mis teeb neist selgrootute bioloogias genoomiüleste RNAi sõelumiste nurgakivimudeli.

KC-rakke saab kasutada Drosophila rakubioloogias, genoomiülestes RNAi- ja CRISPR-sõelumistes, signaaliülekande radade uuringutes (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), kaasasündinud immuunsuse uurimisel ning evolutsiooniliselt säilinud radade võrdlevates uuringutes. Täielikult sekveneeritud ja annotatsioonidega varustatud Drosophila genoom koos ulatuslike avalikult kättesaadavate RNAi-reaktiivide andmebaasidega (nt DRSC/TRiP) muudab KC-rakud eriti võimsaks vahendiks erapooletuks funktsionaalse genoomika avastuste tegemiseks. SV40-ga immortalisatsiooni tõttu kehtib BSL-2 klassifikatsioon.

Kude
Embrüo
Haigus
Tavaline
Metastaaside asukoht
Embrüo (seljaosa sulgumise etapp)
Rakendused
Drosophila rakubioloogia; genoomiüleseid RNAi-sõelumisi; CRISPR-sõelumisi; signaaliülekannet (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); kaasasündinud immuunsust; selgrootute funktsionaalset genoomikat
Sünonüümid
  • KC
  • K C

02Klassifikatsioon

Organism
Puuviljakärbes
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S2
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S2: This Drosophila cell line contains a stably integrated SV40 immortalization cassette. BSL-2 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Omadused

Morfoloogia
Poolkinnitunud epiteelilaadne
Rakutüüp
Embrüonaalsed rakud
Kahekordistumisaeg
umbes 24–48 tundi

04Tunnused

Viide
KC (Cytioni katalooginumber 300604)
NCBI maksukood
7227
Cellosaurus
CVCL_Z833

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Viirusele vastuvõtlikkus
SV40-viirusega surematuks muudetud

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Schneideri Drosophila kasvukeskkond + 2 mM glutamiin + 10% loote veise seerum (FBS).
Inkubatsiooni keskkond

25 °C, ümbritsev õhk (CO₂-d ei ole vaja).

Toidulisandid
Lisage kasvukeskkonnale 2 mM glutamiini ja 10% FBS-i
Dissotsiatsioonireaktiiv
Ei ole vajalik (poolkinnitunud; segage õrnalt uuesti lahustuma)
Kultuuri edasikasvatamine
Pipeteerige kultuuri ettevaatlikult, et poolkinnitunud rakud uuesti suspendeerida. Kandke sobiv kogus uude kolbi ja lisage värsket, eelnevalt soojendatud Schneideri keskkonda. Lahjendage tiheduseni 5 × 10⁵ kuni 1 × 10⁶ rakku/ml. Inkubeerige 25 °C juures õhu käes ilma CO₂-ta.
Jagamissuhe
1–3
Külvitihedus
5 × 10⁵ kuni 1 × 10⁶ rakku/ml
Vedeliku vahetus
Iga 2 kuni 3 päeva tagant
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
Seljaosa sulgemise etapp