Langsung ke isi
Tisu
Embrio
Penyakit
Normal
Lokasi metastasis
Embrio (tahap penutupan punggung)
Sinonim
KC, K C

Dokumen

KC

Cell line · Nomor produk 300604

KC (Kc167) adalah garis sel embrio Drosophila melanogaster yang berasal dari embrio betina pada tahap penutupan bagian dorsal. Garis sel ini awalnya dikembangkan dan telah...

€777.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Dibuat sesuai pesanan
1

01Informasi umum

Deskripsi

KC (Kc167) adalah garis sel embrio Drosophila melanogaster yang berasal dari embrio betina pada tahap penutupan dorsal. Garis sel ini awalnya dikembangkan dan telah banyak digunakan dalam bidang biologi sel Drosophila, penyaringan genetik, dan genomika fungsional. Sel Kc167 telah diimortalkan dengan SV40 dan tumbuh secara semi-adheren, membentuk populasi campuran sel yang menempel dan sel yang mengapung longgar. Sel-sel ini termasuk di antara garis sel Drosophila yang paling terkarakterisasi dengan baik dan sepenuhnya dapat dimanfaatkan untuk penekanan gen yang dimediasi RNAi, menjadikannya model utama untuk skrining RNAi skala genom dalam biologi invertebrata.

Sel KC dapat diterapkan dalam biologi sel Drosophila, skrining RNAi dan CRISPR skala genom, studi jalur transduksi sinyal (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), penelitian imunitas bawaan, serta studi komparatif mengenai jalur yang terkonservasi secara evolusioner. Genom Drosophila yang telah sepenuhnya diurutkan dan dianotasi, dikombinasikan dengan basis data publik yang luas mengenai reagen RNAi (misalnya, DRSC/TRiP), menjadikan sel KC sangat efektif untuk penemuan genomik fungsional yang tidak bias. Klasifikasi BSL-2 berlaku karena adanya imortalisasi SV40.

Tisu
Embrio
Penyakit
Normal
Lokasi metastasis
Embrio (tahap penutupan punggung)
Aplikasi
Biologi sel Drosophila; penyaringan RNAi skala genom; penyaringan CRISPR; transduksi sinyal (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); kekebalan bawaan; genomika fungsional invertebrata
Sinonim
  • KC
  • K C

02Klasifikasi

Organisme
Lalat buah
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Status GMO
GMO-S2
Rincian status GMO
GMO-S2: This Drosophila cell line contains a stably integrated SV40 immortalization cassette. BSL-2 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Tingkat keamanan hayati
2

03Karakteristik

Morfologi
Mirip epitel semi-adhesi
Jenis sel
Sel embrio
Waktu penggandaan
sekitar 24 hingga 48 jam

04Pengidentifikasi

Referensi
KC (Nomor katalog Cytion 300604)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
7227
Cellosaurus
CVCL_Z833

05Ekspresi dan kerentanan

Kerentanan terhadap virus
SV40 yang tidak dapat dimatikan

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
Media Drosophila Schneider + 2 mM glutamin + 10% serum janin sapi (FBS).
Suasana inkubasi

25°C, udara sekitar (tidak memerlukan CO₂).

Suplemen
Tambahkan 2 mM glutamin dan 10% FBS ke dalam medium
Reagen disosiasi
Tidak diperlukan (semi-adheren; aduk perlahan)
Perbanyakan sel
Dengan hati-hati, pipet kultur tersebut untuk melarutkan kembali sel-sel semi-adhesi. Pindahkan volume yang sesuai ke labu baru dan tambahkan medium Schneider yang baru dan telah dihangatkan. Encerkan hingga kepadatan 5 × 10⁵ hingga 1 × 10⁶ sel/ml. Inkubasi pada suhu 25°C di udara ambien tanpa CO₂.
Rasio pemisahan
1 sampai 3
Kepadatan penanaman
5 × 10⁵ hingga 1 × 10⁶ sel/ml
Pergantian cairan
Setiap 2 hingga 3 hari
Pencairan dan pembiakan

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
Tahap penutupan punggung