Siirry sisältöön
Kudos
Alkio
Sairaus
Normaali
Metastaasikohde
Alkio (selkäpuolen sulkeutumisvaihe)
Synonyymit
KC, K C

Asiakirjat

KC

Cell line · Tuotenumero 300604

KC (Kc167) on Drosophila melanogaster -lajin alkion solulinja, joka on peräisin selkäpuolen sulkeutumisvaiheessa olevasta naarasalkiosta. Linja perustettiin alun perin ja se on...

€777.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Valmistetaan tilauksesta
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

KC (Kc167) on Drosophila melanogaster -alkion solulinja, joka on peräisin selkäpuolen sulkeutumisvaiheessa olevasta naarasalkiosta. Linja perustettiin alun perin, ja sitä on käytetty laajalti Drosophila-solubiologiassa, geneettisissä seulonnoissa ja funktionaalisessa genomiikassa. Kc167-solut on immortalisoitu SV40-viruksella, ja ne kasvavat puolikiinnittyneinä muodostaen sekapopulaation, jossa on sekä kiinnittyneitä että löyhästi kelluvia soluja. Ne kuuluvat parhaiten karakterisoituihin Drosophila-solulinjoihin ja soveltuvat erinomaisesti RNAi-välitteiseen geenien vaimentamiseen, mikä tekee niistä kulmakivimallin koko genomin kattaville RNAi-seulonnoille selkärangattomien biologiassa.

KC-soluja voidaan käyttää Drosophila-solubiologiassa, koko genomin kattavissa RNAi- ja CRISPR-seulonnoissa, signaalinsiirtoreittien tutkimuksissa (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), luontaisen immuniteetin tutkimuksessa sekä evoluutiossa säilyneiden reittien vertailututkimuksissa. Täysin sekvensoitu ja annotoitu Drosophila-genomi yhdistettynä laajoihin julkisiin RNAi-reagenssien tietokantoihin (esim. DRSC/TRiP) tekee KC-soluista erityisen tehokkaita puolueettomaan funktionaalisen genomiikan tutkimukseen. SV40-immortalisoinnin vuoksi soluihin sovelletaan BSL-2-luokitusta.

Kudos
Alkio
Sairaus
Normaali
Metastaasikohde
Alkio (selkäpuolen sulkeutumisvaihe)
Sovellukset
Drosophila-solubiologia; koko genomin kattavat RNAi-seulonnat; CRISPR-seulonnat; signaalinsiirto (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); luontainen immuunivaste; selkärangattomien funktionaalinen genomiikka
Synonyymit
  • KC
  • K C

02Luokittelu

Organismi
Hedelmäkärpänen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S2
GMO-statuksen tiedot
GMO-S2: This Drosophila cell line contains a stably integrated SV40 immortalization cassette. BSL-2 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
2

03Ominaisuudet

Morfologia
Osittain kiinnittynyt, epiteelin kaltainen
Solutyyppi
Alkion solut
Kaksinkertaistumisaika
noin 24–48 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
KC (Cytion-tuotenumero 300604)
NCBI-verotunnus
7227
Cellosaurus
CVCL_Z833

05Ilmentyminen ja alttius

Viruksille altistuminen
SV40:n ikuistaminen

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
Schneiderin Drosophila-kasvatusliuos + 2 mM glutamiinia + 10 % sikiön naudan seerumia (FBS).
Inkubaatioilma

25 °C, ympäröivä ilma (ei vaadi CO₂:ta).

Ravintolisät
Lisää elatusaineeseen 2 mM glutamiinia ja 10 % FBS:ää
Dissosiaatioreagenssi
Ei vaadita (puolikiinnittynyt; sekoita varovasti uudelleen)
Soluviljely
Pipetoi viljelmää varovasti, jotta puolikiinnittyneet solut irtoavat. Siirrä sopiva tilavuus uuteen pulloon ja lisää tuoretta, esilämmitettyä Schneiderin elatusainetta. Laimenna tiheyteen 5 × 10⁵ – 1 × 10⁶ solua/ml. Inkuboi 25 °C:ssa ilmakehän ilmassa ilman CO₂:ta.
Jakosuhde
1–3
Kylvötiheys
5 × 10⁵ – 1 × 10⁶ solua/ml
Nesteen uusiminen
2-3 päivän välein
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Selkäpuolen sulkeutumisvaihe