Tartalomra ugrás
Szövet
Embrió
Betegség
Normál
Áttétes hely
Embrió (dorsális záródás stádiuma)
Szinonimák
KC, K C

Dokumentumok

KC

Cell line · Termékszám 300604

A KC (Kc167) egy Drosophila melanogaster embrionális sejtvonal, amelyet egy háti záródási stádiumban lévő nőstény embrióból nyertek. A vonalat eredetileg létrehozták, és…

€777.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Rendelésre készül
1

01Általános információk

Leírás

A KC (Kc167) egy Drosophila melanogaster embrionális sejtvonal, amelyet egy háti záródási stádiumban lévő nőstény embrióból nyertek. A vonalat eredetileg létrehozták, és azóta széles körben használják a Drosophila sejtbiológiában, genetikai szűrésekben és a funkcionális genomikában. A Kc167 sejteket SV40-nel halhatatlanná tették, és félig adhezív módon növekednek, így tapadó és lazán lebegő sejtekből álló vegyes populációt alkotnak. Ezek a sejtvonalak a legjobban jellemzett Drosophila-sejtvonalak közé tartoznak, és teljes mértékben alkalmasak az RNAi-közvetített géncsendesítésre, ami a gerinctelen biológiában a genomszintű RNAi-szűrések alapvető modelljévé teszi őket.

A KC sejtek alkalmazhatók a Drosophila sejtbiológiában, a genomszintű RNAi- és CRISPR-szűrésekben, a jelátviteli útvonalak vizsgálatában (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), a veleszületett immunitás kutatásában, valamint az evolúciósan konzervált útvonalak összehasonlító tanulmányozásában. A teljes mértékben szekvenált és annotált Drosophila-genom, valamint az RNAi-reagensekről szóló kiterjedt nyilvános adatbázisok (pl. DRSC/TRiP) együttesen teszik a KC-sejteket különösen hatékonnyá a torzításmentes funkcionális genomikai felfedezésekhez. Az SV40-vel történő immortilizálás miatt a sejtek BSL-2 besorolás alá tartoznak.

Szövet
Embrió
Betegség
Normál
Áttétes hely
Embrió (dorsális záródás stádiuma)
Alkalmazások
Drosophila sejtbiológia; genomszintű RNAi-szűrések; CRISPR-szűrések; jelátvitel (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); veleszületett immunitás; gerinctelenek funkcionális genomikája
Szinonimák
  • KC
  • K C

02Osztályozás

Organizmus
Gyümölcsmoly
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S2
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S2: This Drosophila cell line contains a stably integrated SV40 immortalization cassette. BSL-2 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
2

03Jellemzők

Morfológia
Részben tapadó, hámsejtszerű
Sejttípus
Embrionális sejtek
Kettőzési idő
kb. 24–48 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
KC (Cytion katalógusszám: 300604)
NCBI adóazonosító szám
7227
Cellosaurus
CVCL_Z833

05Kifejeződés és fogékonyság

Vírusérzékenység
SV40-vírus által halhatatlanná tett

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
Schneider-féle Drosophila-táptalaj + 2 mM glutamin + 10% borjúszérum (FBS).
Inkubációs környezet

25 °C, környezeti levegő (nincs szükség CO₂-ra).

Kiegészítők
A tápközeget egészítsük ki 2 mM glutaminnal és 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Nem szükséges (részben tapadó; óvatosan keverje fel újra)
Átültetés
Óvatosan pipettázzuk át a tenyészetet a félig tapadó sejtek újbóli szuszpendálása érdekében. Vigyen át megfelelő mennyiséget egy új lombikba, és adjon hozzá friss, előmelegített Schneider-táptalajt. Hígítsa 5 × 10⁵ – 1 × 10⁶ sejt/ml sűrűségre. Inkubálja 25 °C-on, CO₂-mentes környezeti levegőn.
Osztási arány
1–3
Ültetési sűrűség
5 × 10⁵ – 1 × 10⁶ sejt/ml
Folyadékcsere
2-3 naponta
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
A háti záródás szakasza