Pāriet uz saturu
Audums
Embrijs
Slimība
Parasts
Metastāžu vieta
Embrijs (mugurējās slēgšanās stadija)
Sinonīmi
KC, K C

Dokumenti

KC

Cell line · Preces numurs 300604

KC (Kc167) ir Drosophila melanogaster embriju šūnu līnija, kas iegūta no sieviešu dzimuma embrija dorsālās slēgšanās stadijā. Šī līnija sākotnēji tika izveidota un ir...

€777.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Pēc pasūtījuma
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

KC (Kc167) ir Drosophila melanogaster embrionālā šūnu līnija, kas iegūta no sieviešu dzimuma embrija dorsālās slēgšanās stadijā. Šī līnija sākotnēji tika izveidota un ir plaši izmantota Drosophila šūnu bioloģijā, ģenētiskajos skrīningos un funkcionālajā genomikā. Kc167 šūnas ir imortalizētas ar SV40 un aug daļēji adhezīvi, veidojot jauktu populāciju no piestiprinātām un brīvi peldošām šūnām. Tās ir vienas no vislabāk raksturotajām Drosophila šūnu līnijām un ir pilnībā piemērotas RNSi-mediētai gēnu klusināšanai, padarot tās par pamata modeli genomam plašiem RNSi skrīningiem bezmugurkaulnieku bioloģijā.

KC šūnas ir piemērotas Drosophila šūnu bioloģijā, genomā plaša mēroga RNAi un CRISPR skrīningos, signālu pārneses ceļu pētījumos (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), iedzimtas imunitātes pētījumos un evolūcijas gaitā saglabājušos ceļu salīdzinošajos pētījumos. Pilnībā sekvencētais un anotētais Drosophila genoms, apvienots ar plašām publiski pieejamām RNAi reaģentu datu bāzēm (piem., DRSC/TRiP), padara KC šūnas īpaši efektīvas objektīviem funkcionālās genomikas atklājumiem. Sakarā ar SV40 imortalizāciju tām piemēro BSL-2 klasifikāciju.

Audums
Embrijs
Slimība
Parasts
Metastāžu vieta
Embrijs (mugurējās slēgšanās stadija)
Pieteikumi
Drosophila šūnu bioloģija; genomiska mēroga RNAi skrīningi; CRISPR skrīningi; signālu pārnese (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); iedzimta imunitāte; bezmugurkaulnieku funkcionālā genomika
Sinonīmi
  • KC
  • K C

02Klasifikācija

Organisms
Augļu muša
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S2
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S2: This Drosophila cell line contains a stably integrated SV40 immortalization cassette. BSL-2 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
2

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Daļēji piekļāvušs epitēlija tipa
Šūnu tips
Embrionālās šūnas
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
aptuveni 24 līdz 48 stundas

04Identifikatori

Atsauce
KC (Cytion kataloga numurs 300604)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
7227
Cellosaurus
CVCL_Z833

05Pazīmes un uzņēmība

Jutība pret vīrusiem
SV40 ir iegūstis nemirstību

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
Šneidera Drosophila barotne + 2 mM glutamīns + 10 % teļa embriju serums (FBS).
Inkubācijas vide

25 °C, apkārtējā gaisa temperatūra (CO₂ nav nepieciešams).

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar 2 mM glutamīnu un 10 % FBS
Disociācijas reaģents
Nav nepieciešams (daļēji pielipis; viegli atkārtoti suspendējiet)
Pārstādīšana
Ar pipeti uzmanīgi pārlej kultūru, lai atkal suspendētu daļēji piekļāvušās šūnas. Pārlejiet atbilstošu tilpumu jaunā kolbā un pievienojiet svaigu, iepriekš uzsildītu Šneidera barotni. Atšķaidiet līdz blīvumam 5 × 10⁵ līdz 1 × 10⁶ šūnu/ml. Inkubējiet 25 °C temperatūrā gaisā bez CO₂.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 3
Sēšanas blīvums
no 5 × 10⁵ līdz 1 × 10⁶ šūnu/ml
Šķidruma atjaunošana
Ik pēc 2 līdz 3 dienām
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
Mugurējās slēgšanās posms