Przejdź do treści
Chusteczka
Zarodek
Choroba
Normalny
Miejsce przerzutów
Zarodek (etap zamknięcia grzbietowego)
Synonimy
KC, K C

Dokumenty

KC

Cell line · Numer produktu 300604

KC (Kc167) to linia komórek embrionalnych Drosophila melanogaster pochodząca z embrionu samicy w stadium zamknięcia grzbietu. Linia ta została pierwotnie wyhodowana i...

€777.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

Wykonane na zamówienie
1

01Informacje ogólne

Opis

KC (Kc167) to linia komórek embrionalnych Drosophila melanogaster pochodząca z embrionu samicy w stadium zamknięcia grzbietu. Linia ta została pierwotnie wyhodowana i jest szeroko stosowana w biologii komórkowej Drosophila, badaniach genetycznych oraz genomice funkcjonalnej. Komórki Kc167 zostały uwiecznione za pomocą wirusa SV40 i rosną w sposób póładhezyjny, tworząc mieszaną populację komórek przylegających do podłoża oraz luźno unoszących się w hodowli. Należą one do najlepiej scharakteryzowanych linii komórkowych Drosophila i w pełni nadają się do wyciszania genów za pomocą RNAi, co czyni je podstawowym modelem do badań przesiewowych z wykorzystaniem RNAi w skali całego genomu w biologii bezkręgowców.

Komórki KC znajdują zastosowanie w biologii komórkowej Drosophila, badaniach przesiewowych z wykorzystaniem RNAi i CRISPR obejmujących cały genom, badaniach szlaków transdukcji sygnału (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), badaniach nad odpornością wrodzoną oraz badaniach porównawczych szlaków zachowanych w procesie ewolucji. W pełni zsekwencjonowany i opatrzony adnotacjami genom Drosophila, w połączeniu z obszernymi publicznymi bazami danych odczynników RNAi (np. DRSC/TRiP), sprawia, że komórki KC są szczególnie przydatne do obiektywnych odkryć w zakresie genomiki funkcjonalnej. Ze względu na unieśmiertelnienie wirusem SV40 komórki te podlegają klasyfikacji BSL-2.

Chusteczka
Zarodek
Choroba
Normalny
Miejsce przerzutów
Zarodek (etap zamknięcia grzbietowego)
Zastosowania
Biologia komórkowa Drosophila; badania przesiewowe z wykorzystaniem RNAi obejmujące cały genom; badania przesiewowe z wykorzystaniem CRISPR; transdukcja sygnału (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); odporność wrodzona; genomika funkcjonalna bezkręgowców
Synonimy
  • KC
  • K C

02Klasyfikacja

Organizm
Mucha owocowa
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO-S2
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S2: This Drosophila cell line contains a stably integrated SV40 immortalization cassette. BSL-2 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
2

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Półprzylegający, podobny do nabłonka
Typ komórki
Komórki embrionalne
Czas podwojenia
ok. 24–48 godzin

04Identyfikatory

Źródło
KC (numer katalogowy Cytion 300604)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
7227
Cellosaurus
CVCL_Z833

05Ekspresja i podatność

Podatność na wirusy
SV40 uodporniony

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
Pożywka Schneidera dla muszek owocówek + 2 mM glutaminy + 10% surowicy płodowej bydlęcej (FBS).
Atmosfera inkubacyjna

25°C, powietrze otoczenia (nie wymaga CO₂).

Suplementy
Do pożywki należy dodać 2 mM glutaminy i 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Nie jest wymagane (póładhezyjne; delikatnie zawiesić w roztworze)
Hodowla komórek w subkulturze
Delikatnie pipetować hodowlę, aby ponownie zawiesić komórki półprzylegające. Przenieść odpowiednią objętość do nowej kolby i dodać świeżą, wstępnie podgrzaną pożywkę Schneidera. Rozcieńczyć do stężenia od 5 × 10⁵ do 1 × 10⁶ komórek/ml. Inkubować w temperaturze 25°C w powietrzu atmosferycznym bez CO₂.
Współczynnik podziału
od 1 do 3
Gęstość wysiewu
od 5 × 10⁵ do 1 × 10⁶ komórek/ml
Odnawianie płynów
Co 2 do 3 dni
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
Etap zamykania grzbietowego