- Chusteczka
- Zarodek
- Choroba
- Normalny
- Miejsce przerzutów
- Zarodek (etap zamknięcia grzbietowego)
- Synonimy
- KC, K C
Dokumenty
KC
Cell line · Numer produktu 300604
KC (Kc167) to linia komórek embrionalnych Drosophila melanogaster pochodząca z embrionu samicy w stadium zamknięcia grzbietu. Linia ta została pierwotnie wyhodowana i...
Dostosowanie / Zalecenia
- KCCell line€777.00
01Informacje ogólne
- Opis
KC (Kc167) to linia komórek embrionalnych Drosophila melanogaster pochodząca z embrionu samicy w stadium zamknięcia grzbietu. Linia ta została pierwotnie wyhodowana i jest szeroko stosowana w biologii komórkowej Drosophila, badaniach genetycznych oraz genomice funkcjonalnej. Komórki Kc167 zostały uwiecznione za pomocą wirusa SV40 i rosną w sposób póładhezyjny, tworząc mieszaną populację komórek przylegających do podłoża oraz luźno unoszących się w hodowli. Należą one do najlepiej scharakteryzowanych linii komórkowych Drosophila i w pełni nadają się do wyciszania genów za pomocą RNAi, co czyni je podstawowym modelem do badań przesiewowych z wykorzystaniem RNAi w skali całego genomu w biologii bezkręgowców.
Komórki KC znajdują zastosowanie w biologii komórkowej Drosophila, badaniach przesiewowych z wykorzystaniem RNAi i CRISPR obejmujących cały genom, badaniach szlaków transdukcji sygnału (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), badaniach nad odpornością wrodzoną oraz badaniach porównawczych szlaków zachowanych w procesie ewolucji. W pełni zsekwencjonowany i opatrzony adnotacjami genom Drosophila, w połączeniu z obszernymi publicznymi bazami danych odczynników RNAi (np. DRSC/TRiP), sprawia, że komórki KC są szczególnie przydatne do obiektywnych odkryć w zakresie genomiki funkcjonalnej. Ze względu na unieśmiertelnienie wirusem SV40 komórki te podlegają klasyfikacji BSL-2.
- Chusteczka
- Zarodek
- Choroba
- Normalny
- Miejsce przerzutów
- Zarodek (etap zamknięcia grzbietowego)
- Zastosowania
- Biologia komórkowa Drosophila; badania przesiewowe z wykorzystaniem RNAi obejmujące cały genom; badania przesiewowe z wykorzystaniem CRISPR; transdukcja sygnału (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); odporność wrodzona; genomika funkcjonalna bezkręgowców
- Synonimy
- KC
- K C
02Klasyfikacja
- Organizm
- Mucha owocowa
- Seks
- Kobieta
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Status GMO
- GMO-S2
- Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
- GMO-S2: This Drosophila cell line contains a stably integrated SV40 immortalization cassette. BSL-2 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 2
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Półprzylegający, podobny do nabłonka
- Typ komórki
- Komórki embrionalne
- Czas podwojenia
- ok. 24–48 godzin
04Identyfikatory
- Źródło
- KC (numer katalogowy Cytion 300604)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 7227
- Cellosaurus
- CVCL_Z833
05Ekspresja i podatność
- Podatność na wirusy
- SV40 uodporniony
06Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- Pożywka Schneidera dla muszek owocówek + 2 mM glutaminy + 10% surowicy płodowej bydlęcej (FBS).
- Atmosfera inkubacyjna
25°C, powietrze otoczenia (nie wymaga CO₂).
- Suplementy
- Do pożywki należy dodać 2 mM glutaminy i 10% FBS
- Odczynnik dysocjacyjny
- Nie jest wymagane (póładhezyjne; delikatnie zawiesić w roztworze)
- Hodowla komórek w subkulturze
- Delikatnie pipetować hodowlę, aby ponownie zawiesić komórki półprzylegające. Przenieść odpowiednią objętość do nowej kolby i dodać świeżą, wstępnie podgrzaną pożywkę Schneidera. Rozcieńczyć do stężenia od 5 × 10⁵ do 1 × 10⁶ komórek/ml. Inkubować w temperaturze 25°C w powietrzu atmosferycznym bez CO₂.
- Współczynnik podziału
- od 1 do 3
- Gęstość wysiewu
- od 5 × 10⁵ do 1 × 10⁶ komórek/ml
- Odnawianie płynów
- Co 2 do 3 dni
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
08Darczyńca
- Wiek dawcy
- Etap zamykania grzbietowego
09Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak