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BRL-3A
Tissu
Foie
Synonymes
BRL3A, BRL 3A, Buffalo Rat Liver-3A

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BRL-3A

Cell line · Référence du produit 500129

The BRL-3A cell line is derived from the normal liver of a male Buffalo rat. Established in 1976, this cell line is an important in vitro model primarily ...

€430.00hors taxes et frais de port
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01Informations générales

Description

La lignée cellulaire BRL-3A est dérivée du foie normal d'un rat mâle Buffalo. Créée en 1976, cette lignée cellulaire est un modèle in vitro important, principalement utilisé pour étudier la fonction hépatocytaire, les mécanismes de régénération du foie et l'hépatotoxicité. Les cellules BRL-3A conservent plusieurs caractéristiques des hépatocytes primaires, notamment la capacité de synthétiser de l'albumine et d'autres protéines sériques, ce qui en fait un outil précieux pour la recherche hépatologique. Ces cellules présentent une morphologie de type épithélial et sont adhérentes avec un taux de croissance élevé en culture.

L'intérêt scientifique pour BRL-3A s'étend à son application dans l'étude des infections virales spécifiques au foie, du métabolisme des médicaments et des effets de divers facteurs de croissance et cytokines sur les cellules hépatiques. Les chercheurs utilisent également les cellules BRL-3A pour étudier l'impact des toxines et des carcinogènes sur la fonction hépatique, ce qui permet de mieux comprendre l'hépatocarcinogenèse et les lésions du foie. Les cellules sont connues pour répondre aux proliférateurs de peroxysomes et ont été utilisées pour tester l'efficacité et la sécurité des produits pharmaceutiques susceptibles d'affecter la fonction hépatique.

Cependant, malgré leur polyvalence, les utilisateurs de la lignée cellulaire BRL-3A doivent tenir compte des limites inhérentes à un modèle non humain, car les résultats ne sont pas toujours directement transposables à la physiologie du foie humain. Ce facteur souligne l'importance de corroborer les résultats avec d'autres modèles et approches expérimentales.

Tissu
Foie
Synonymes
  • BRL3A
  • BRL 3A
  • Buffalo Rat Liver-3A

02Classification

Organisme
Rat
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Identifiants

Référence
BRL-3A (numéro de catalogue Cytion 500129)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0606

04Expression et sensibilité

Produits
Activité de stimulation de la multiplication (MSA).

05Manipulation et culture

Milieu de culture
Ham's F12, w : 1.0 mM Glutamine stable, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium, w : 1.1 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820600a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
Une densité d'ensemencement de 1 x 104 cellules/cm2 est recommandée.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Récupération après le dégel
Après décongélation, ensemencer les cellules à raison de 5 x 104 cellules/cm2 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.