Gå direkte til indholdet
BRL-3A
Væv
Lever
Synonymer
BRL3A, BRL 3A, Buffalo Rat Liver-3A

Dokumenter

BRL-3A

Cell line · Varenummer 500129

The BRL-3A cell line is derived from the normal liver of a male Buffalo rat. Established in 1976, this cell line is an important in vitro model primarily ...

€430.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

BRL-3A-cellelinjen stammer fra den normale lever hos en Buffalo-hanrotte. Denne cellelinje blev etableret i 1976 og er en vigtig in vitro-model, der primært bruges til at studere hepatocytfunktion, leverregenerationsmekanismer og hepatotoksicitet. BRL-3A-celler bevarer flere af de primære hepatocytters egenskaber, herunder evnen til at syntetisere albumin og andre serumproteiner, hvilket gør dem til et værdifuldt værktøj i hepatologisk forskning. Disse celler har en epitellignende morfologi og er adhærente med en høj væksthastighed i kultur.

Den videnskabelige interesse for BRL-3A strækker sig til anvendelse i studiet af leverspecifikke virusinfektioner, lægemiddelmetabolisme og virkningerne af forskellige vækstfaktorer og cytokiner på leverceller. Forskere bruger også BRL-3A-celler til at undersøge toksiners og kræftfremkaldende stoffers indvirkning på leverfunktionen, hvilket giver indsigt i hepatokarcinogenese og leverskader. Cellerne er kendt for at reagere på peroxisomproliferatorer og er blevet brugt til at teste effekten og sikkerheden af lægemidler, der potentielt kan påvirke leverfunktionen.

På trods af deres alsidighed skal brugere af BRL-3A-cellelinjen dog overveje de begrænsninger, der ligger i en ikke-menneskelig model, da resultaterne ikke altid kan overføres direkte til den menneskelige leverfysiologi. Denne faktor understreger vigtigheden af at bekræfte resultaterne med yderligere modeller og eksperimentelle tilgange.

Væv
Lever
Synonymer
  • BRL3A
  • BRL 3A
  • Buffalo Rat Liver-3A

02Klassificering

Organisme
Rotte
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Identifikatorer

Kildehenvisning
BRL-3A (Cytion katalognummer 500129)
NCBI-skattenummer
10116
Cellosaurus
CVCL_0606

04Udtryk og modtagelighed

Produkter
Multiplikationsstimulerende aktivitet (MSA).

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabil glutamin, w: 1,0 mM natriumpyruvat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820600a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
Det anbefales at så med en tæthed på 1 x 104 celler/cm2.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.