Pāriet uz saturu
BRL-3A
Audums
Aknas
Sinonīmi
BRL3A, BRL 3A, Buffalo Rat Liver-3A

Dokumenti

BRL-3A

Cell line · Preces numurs 500129

The BRL-3A cell line is derived from the normal liver of a male Buffalo rat. Established in 1976, this cell line is an important in vitro model primarily ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

BRL-3A šūnu līnija ir iegūta no normālām Bufalo žurkas tēviņa aknām. Šī 1976. gadā izveidotā šūnu līnija ir svarīgs in vitro modelis, ko galvenokārt izmanto hepatocītu funkcijas, aknu reģenerācijas mehānismu un hepatotoksicitātes pētījumiem. BRL-3A šūnas saglabā vairākas primāro hepatocītu īpašības, tostarp spēju sintezēt albumīnu un citus seruma proteīnus, padarot tās par vērtīgu instrumentu hepatoloģiskajos pētījumos. Šīm šūnām piemīt epitēlijam līdzīga morfoloģija, tās ir adherētas un aug ar augstu augšanas ātrumu kultūrā.

Zinātnieku interese par BRL-3A paplašina tās pielietojumu, pētot aknām specifiskas vīrusu infekcijas, zāļu metabolismu un dažādu augšanas faktoru un citokīnu ietekmi uz aknu šūnām. Pētnieki izmanto BRL-3A šūnas arī toksīnu un kancerogēnu ietekmes uz aknu darbību izpētei, sniedzot ieskatu hepatokarcinogēnā un aknu bojājumos. Ir zināms, ka šūnas reaģē uz peroksisomu proliferatoriem, un tās ir izmantotas, lai pārbaudītu farmaceitisko līdzekļu, kas var ietekmēt aknu darbību, efektivitāti un drošību.

Tomēr, neraugoties uz BRL-3A šūnu līnijas daudzpusību, tās lietotājiem jāņem vērā ierobežojumi, kas raksturīgi modelim, kas nav cilvēka modelis, jo rezultāti ne vienmēr var tikt tieši attiecināti uz cilvēka aknu fizioloģiju. Šis faktors uzsver to, cik svarīgi ir iegūtos rezultātus apstiprināt ar papildu modeļiem un eksperimentālām pieejām.

Audums
Aknas
Sinonīmi
  • BRL3A
  • BRL 3A
  • Buffalo Rat Liver-3A

02Klasifikācija

Organisms
Žurka
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Identifikatori

Atsauce
BRL-3A (Cytion kataloga numurs 500129)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10116
Cellosaurus
CVCL_0606

04Pazīmes un uzņēmība

Produkti
Multiplikāciju stimulējoša darbība (MSA).

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
Hama F12, w: 1,0 mM stabils glutamīns, w: 1,0 mM nātrija piruvāts, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820600a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
Ieteicamā sēšanas blīvums ir 1 x 104 šūnas/cm2.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.