Mine otse sisu juurde
BRL-3A
Kude
Maksa
Sünonüümid
BRL3A, BRL 3A, Buffalo Rat Liver-3A

Dokumendid

BRL-3A

Cell line · Toote number 500129

The BRL-3A cell line is derived from the normal liver of a male Buffalo rat. Established in 1976, this cell line is an important in vitro model primarily ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

BRL-3A rakuliin on saadud isase Buffalo roti normaalsest maksast. See 1976. aastal loodud rakuliin on oluline in vitro mudel, mida kasutatakse peamiselt hepatotsüütide funktsiooni, maksa regenereerimise mehhanismide ja hepatotoksilisuse uurimiseks. BRL-3A rakud säilitavad mitmeid primaarsete hepatotsüütide omadusi, sealhulgas võime sünteesida albumiini ja muid seerumi valke, mis muudab need väärtuslikuks vahendiks hepatoloogilistes uuringutes. Neil rakkudel on epiteelilaadne morfoloogia ja nad on kultuuris suure kasvukiirusega kleepuvad.

Teaduslik huvi BRL-3A vastu ulatub selle rakendamiseni maksaspetsiifiliste viirusinfektsioonide, ravimite metabolismi ning erinevate kasvufaktorite ja tsütokiinide mõju uurimisel maksarakkudele. Teadlased kasutavad BRL-3A rakke ka toksiinide ja kantserogeenide mõju uurimiseks maksafunktsioonile, andes ülevaate hepatokartsinogeneesist ja maksakahjustustest. On teada, et rakud reageerivad peroksisoomi proliferaatoritele ning neid on kasutatud maksafunktsiooni potentsiaalselt mõjutavate ravimite tõhususe ja ohutuse testimiseks.

Vaatamata mitmekülgsusele peavad BRL-3A rakuliini kasutajad siiski arvestama mitteinimese mudelile omaste piirangutega, kuna tulemused ei pruugi alati olla otseselt ülekantavad inimese maksa füsioloogiale. See tegur rõhutab, kui oluline on kinnitada tulemusi täiendavate mudelite ja eksperimentaalsete meetoditega.

Kude
Maksa
Sünonüümid
  • BRL3A
  • BRL 3A
  • Buffalo Rat Liver-3A

02Klassifikatsioon

Organism
Rott
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Tunnused

Viide
BRL-3A (Cytioni katalooginumber 500129)
NCBI maksukood
10116
Cellosaurus
CVCL_0606

04Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Tooted
Multiplikatsiooni stimuleeriv tegevus (MSA).

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Ham's F12, w: 1,0 mM stabiilne glutamiin, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820600a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
Soovitatav seemendustihedus on 1 x 104 rakku/cm2.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.