BRL-3A
Cell line · Toote number 500129
The BRL-3A cell line is derived from the normal liver of a male Buffalo rat. Established in 1976, this cell line is an important in vitro model primarily ...
Kohandamine / Soovitused
- BRL-3ACell line€430.00
01Üldine teave
- Kirjeldus
BRL-3A rakuliin on saadud isase Buffalo roti normaalsest maksast. See 1976. aastal loodud rakuliin on oluline in vitro mudel, mida kasutatakse peamiselt hepatotsüütide funktsiooni, maksa regenereerimise mehhanismide ja hepatotoksilisuse uurimiseks. BRL-3A rakud säilitavad mitmeid primaarsete hepatotsüütide omadusi, sealhulgas võime sünteesida albumiini ja muid seerumi valke, mis muudab need väärtuslikuks vahendiks hepatoloogilistes uuringutes. Neil rakkudel on epiteelilaadne morfoloogia ja nad on kultuuris suure kasvukiirusega kleepuvad.
Teaduslik huvi BRL-3A vastu ulatub selle rakendamiseni maksaspetsiifiliste viirusinfektsioonide, ravimite metabolismi ning erinevate kasvufaktorite ja tsütokiinide mõju uurimisel maksarakkudele. Teadlased kasutavad BRL-3A rakke ka toksiinide ja kantserogeenide mõju uurimiseks maksafunktsioonile, andes ülevaate hepatokartsinogeneesist ja maksakahjustustest. On teada, et rakud reageerivad peroksisoomi proliferaatoritele ning neid on kasutatud maksafunktsiooni potentsiaalselt mõjutavate ravimite tõhususe ja ohutuse testimiseks.
Vaatamata mitmekülgsusele peavad BRL-3A rakuliini kasutajad siiski arvestama mitteinimese mudelile omaste piirangutega, kuna tulemused ei pruugi alati olla otseselt ülekantavad inimese maksa füsioloogiale. See tegur rõhutab, kui oluline on kinnitada tulemusi täiendavate mudelite ja eksperimentaalsete meetoditega.
- Kude
- Maksa
- Sünonüümid
- BRL3A
- BRL 3A
- Buffalo Rat Liver-3A
02Klassifikatsioon
- Organism
- Rott
- Kasvuvõime
- Järgija
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Tunnused
- Viide
- BRL-3A (Cytioni katalooginumber 500129)
- NCBI maksukood
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_0606
04Avaldumine ja vastuvõtlikkus
- Tooted
- Multiplikatsiooni stimuleeriv tegevus (MSA).
05Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- Ham's F12, w: 1,0 mM stabiilne glutamiin, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820600a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 10% FBS-ga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
- Külvitihedus
- Soovitatav seemendustihedus on 1 x 104 rakku/cm2.
- Vedeliku vahetus
- 2 kuni 3 korda nädalas
- Taastumine pärast sulamist
- Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
07Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Vastutuse välistamine
- Meie rakud on ette nähtud üksnes in vitro laboratoorseks uurimistööks ning need ei ole mõeldud kliiniliseks või diagnostiliseks kasutamiseks, samuti ei tohi neid manustada inimestele ega kasutada veterinaarsetel eesmärkidel. Kasutajad peavad järgima kõiki kohaldatavaid suuniseid ja eeskirju nende rakkude käitlemise ja kasutamise kohta teadusuuringutes.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah
.jpg)