Siirry sisältöön
BRL-3A
Kudos
Maksa
Synonyymit
BRL3A, BRL 3A, Buffalo Rat Liver-3A

Asiakirjat

BRL-3A

Cell line · Tuotenumero 500129

The BRL-3A cell line is derived from the normal liver of a male Buffalo rat. Established in 1976, this cell line is an important in vitro model primarily ...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

BRL-3A-solulinja on peräisin urospuolisen Buffalo-rotan normaalista maksasta. Tämä vuonna 1976 perustettu solulinja on tärkeä in vitro -malli, jota käytetään ensisijaisesti hepatosyyttien toiminnan, maksan regeneraatiomekanismien ja hepatotoksisuuden tutkimiseen. BRL-3A-solut säilyttävät useita primaaristen hepatosyyttien ominaisuuksia, kuten kyvyn syntetisoida albumiinia ja muita seerumin proteiineja, mikä tekee niistä arvokkaan työkalun hepatologisessa tutkimuksessa. Näillä soluilla on epiteelin kaltainen morfologia, ne ovat tarttuvia ja kasvavat nopeasti viljelyssä.

Tieteellinen kiinnostus BRL-3A:ta kohtaan ulottuu sen soveltamiseen maksaspesifisten virusinfektioiden, lääkeaineenvaihdunnan sekä erilaisten kasvutekijöiden ja sytokiinien vaikutusten tutkimiseen maksasoluissa. Tutkijat käyttävät BRL-3A-soluja myös tutkiessaan myrkkyjen ja karsinogeenien vaikutusta maksan toimintaan, mikä antaa tietoa hepatokarsinogeneesistä ja maksavaurioista. Solujen tiedetään reagoivan peroksisomiproliferaattoreihin, ja niitä on käytetty maksan toimintaan mahdollisesti vaikuttavien lääkkeiden tehokkuuden ja turvallisuuden testaamiseen.

Monipuolisuudestaan huolimatta BRL-3A-solulinjan käyttäjien on kuitenkin otettava huomioon ei-inhimilliseen malliin liittyvät rajoitukset, sillä tulokset eivät aina ole suoraan siirrettävissä ihmisen maksan fysiologiaan. Tämä seikka korostaa sitä, että on tärkeää vahvistaa tulokset muilla malleilla ja kokeellisilla lähestymistavoilla.

Kudos
Maksa
Synonyymit
  • BRL3A
  • BRL 3A
  • Buffalo Rat Liver-3A

02Luokittelu

Organismi
Rotta
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Tunnisteet

Lähdeviite
BRL-3A (Cytionin luettelonumero 500129)
NCBI-verotunnus
10116
Cellosaurus
CVCL_0606

04Ilmentyminen ja alttius

Tuotteet
Moninkertaistumista edistävä toiminta (MSA).

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
Ham's F12, w: 1,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820600a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
Suositeltava siemen tiheys on 1 x 104 solua/cm2.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.