Tartalomra ugrás
BRL-3A
Szövet
Máj
Szinonimák
BRL3A, BRL 3A, Buffalo Rat Liver-3A

Dokumentumok

BRL-3A

Cell line · Termékszám 500129

The BRL-3A cell line is derived from the normal liver of a male Buffalo rat. Established in 1976, this cell line is an important in vitro model primarily ...

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A BRL-3A sejtvonal hím Buffalo patkány normál májából származik. Az 1976-ban létrehozott sejtvonal fontos in vitro modell, amelyet elsősorban a májsejtek működésének, a májregenerációs mechanizmusoknak és a hepatotoxicitásnak a tanulmányozására használnak. A BRL-3A sejtek megtartják a primer hepatociták számos jellemzőjét, beleértve az albumin és más szérumfehérjék szintézisének képességét, ami értékes eszközzé teszi őket a hepatológiai kutatásokban. Ezek a sejtek epithelszerű morfológiát mutatnak, és kultúrában nagy növekedési sebességgel tapadnak.

A BRL-3A iránti tudományos érdeklődés kiterjed a májspecifikus vírusfertőzések, a gyógyszer-metabolizmus, valamint a különböző növekedési faktorok és citokinek májsejtekre gyakorolt hatásainak vizsgálatára. A kutatók a BRL-3A sejteket a toxinok és karcinogének májműködésre gyakorolt hatásának vizsgálatára is használják, betekintést nyújtva a hepatokarcinogenezisbe és a májkárosodásba. A sejtek köztudottan reagálnak a peroxiszóma proliferátorokra, és a májműködést potenciálisan befolyásoló gyógyszerek hatékonyságának és biztonságosságának tesztelésére is használták őket.

Sokoldalúságuk ellenére azonban a BRL-3A sejtvonal felhasználóinak figyelembe kell venniük a nem humán modellből adódó korlátokat, mivel az eredmények nem mindig ültethetők át közvetlenül a humán máj fiziológiájára. Ez a tényező hangsúlyozza annak fontosságát, hogy az eredményeket további modellekkel és kísérleti megközelítésekkel támasszák alá.

Szövet
Máj
Szinonimák
  • BRL3A
  • BRL 3A
  • Buffalo Rat Liver-3A

02Osztályozás

Organizmus
Patkány
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Azonosítók

Hivatkozás
BRL-3A (Cytion katalógusszám: 500129)
NCBI adóazonosító szám
10116
Cellosaurus
CVCL_0606

04Kifejeződés és fogékonyság

Termékek
Szaporodást serkentő tevékenység (MSA).

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
Ham's F12, w: 1,0 mM stabil glutamin, w: 1,0 mM nátrium-piruvát, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion cikkszám 820600a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1 x 104 sejt/cm2 vetési sűrűség ajánlott.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Felolvasztás után helyezze a sejteket 5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felolvadjanak és legalább 24 órán át tapadjanak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.