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BRL-3A
ティッシュ
肝臓
同義語
BRL3A, BRL 3A, Buffalo Rat Liver-3A

BRL-3A

Cell line · 製品番号 500129

The BRL-3A cell line is derived from the normal liver of a male Buffalo rat. Established in 1976, this cell line is an important in vitro model primarily ...

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01概要

説明

BRL-3A細胞株は、雄のバッファローラットの正常肝臓に由来する。1976年に樹立されたこの細胞株は、主に肝細胞機能、肝再生機構、および肝毒性の研究に用いられる重要なin vitroモデルである。BRL-3A細胞は、アルブミンや他の血清タンパク質を合成する能力など、初代肝細胞のいくつかの特徴を保持しており、肝疾患研究における貴重なツールとなっている。BRL-3A細胞は上皮様形態を示し、接着性があり、培養において高い増殖率を示す。

BRL-3Aに対する科学的関心は、肝特異的ウイルス感染、薬物代謝、肝細胞に対する様々な成長因子やサイトカインの影響の研究への応用にまで及んでいる。研究者はまた、毒素や発癌物質が肝機能に及ぼす影響を調べるためにBRL-3A細胞を利用し、肝発癌や肝障害に関する洞察を得ている。BRL-3A細胞はペルオキシソーム増殖剤に反応することが知られており、肝機能に影響を及ぼす可能性のある医薬品の有効性と安全性を試験するために使用されてきた。

しかし、BRL-3A細胞株は多用途であるにもかかわらず、結果が必ずしもヒトの肝生理に直接反映されるとは限らないため、非ヒトモデル特有の限界を考慮しなければならない。このことは、他のモデルや実験的アプローチで得られた知見を裏付けることの重要性を強調している。

ティッシュ
肝臓
同義語
  • BRL3A
  • BRL 3A
  • Buffalo Rat Liver-3A

02分類

生物
ネズミ
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03識別子

引用
BRL-3A (Cytion カタログ番号 500129)
NCBI 納税者番号
10116
セロサウルス
CVCL_0606

04発現と感受性

製品
増殖刺激活性(MSA)。

05取り扱いと飼育

培地
Ham's F12、w:1.0mM安定グルタミン、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム、w:1.1g/L NaHCO3(Cytion article number 820600a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度
1×10⁴細胞/cm²の播種密度が推奨される。
流体の更新
週2~3回
解凍後の回復
解凍後、細胞を5×10⁴細胞/cm²で播種し、凍結処理からの回復と接着を少なくとも24時間以上行う。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。