Pereiti prie turinio
BRL-3A
Audinys
Kepenys
Sinonimai
BRL3A, BRL 3A, Buffalo Rat Liver-3A

Dokumentai

BRL-3A

Cell line · Prekės numeris 500129

The BRL-3A cell line is derived from the normal liver of a male Buffalo rat. Established in 1976, this cell line is an important in vitro model primarily ...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

BRL-3A ląstelių linija yra gauta iš normalių Buffalo žiurkės patinų kepenų. Ši ląstelių linija, sukurta 1976 m., yra svarbus in vitro modelis, visų pirma naudojamas hepatocitų funkcijai, kepenų regeneracijos mechanizmams ir hepatotoksiškumui tirti. BRL-3A ląstelės išlaiko keletą pirminių hepatocitų savybių, įskaitant gebėjimą sintetinti albuminą ir kitus serumo baltymus, todėl jos yra vertinga hepatologinių tyrimų priemonė. Šios ląstelės pasižymi į epitelį panašia morfologija, yra adherentiškos ir labai sparčiai auga kultūroje.

Mokslinis susidomėjimas BRL-3A apima ir jos taikymą tiriant kepenims būdingas virusines infekcijas, vaistų metabolizmą ir įvairių augimo veiksnių bei citokinų poveikį kepenų ląstelėms. Mokslininkai taip pat naudoja BRL-3A ląsteles toksinų ir kancerogenų poveikiui kepenų funkcijai tirti, taip suteikdami žinių apie hepatokarcinogenezę ir kepenų pažeidimus. Ląstelės reaguoja į peroksisomų proliferatorius ir buvo naudojamos vaistų, galinčių paveikti kepenų funkciją, veiksmingumui ir saugumui tirti.

Tačiau, nepaisant BRL-3A ląstelių linijos universalumo, jos naudotojai turi atsižvelgti į apribojimus, būdingus nežmogiškam modeliui, nes rezultatai ne visada gali būti tiesiogiai pritaikomi žmogaus kepenų fiziologijai. Šis veiksnys pabrėžia, kaip svarbu rezultatus patvirtinti naudojant papildomus modelius ir eksperimentinius metodus.

Audinys
Kepenys
Sinonimai
  • BRL3A
  • BRL 3A
  • Buffalo Rat Liver-3A

02Klasifikacija

Organizmas
Žiurkė
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Identifikatoriai

Nuoroda
BRL-3A (Cytion katalogo numeris 500129)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10116
Cellosaurus
CVCL_0606

04Išraiška ir jautrumas

Produktai
Dauginimąsi skatinanti veikla (MSA).

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilus glutaminas, w: 1,0 mM natrio piruvatas, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820600a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
Rekomenduojamas sėjos tankis yra 1 x 104 ląstelės/cm2.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.