Přejít na obsah
BRL-3A
Tkáň
Játra
Synonyma
BRL3A, BRL 3A, Buffalo Rat Liver-3A

Dokumenty

BRL-3A

Cell line · Číslo výrobku 500129

The BRL-3A cell line is derived from the normal liver of a male Buffalo rat. Established in 1976, this cell line is an important in vitro model primarily ...

€430.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie BRL-3A je odvozena z normálních jater samců potkana Buffalo. Tato buněčná linie byla založena v roce 1976 a je důležitým in vitro modelem používaným především pro studium funkce hepatocytů, mechanismů regenerace jater a hepatotoxicity. Buňky BRL-3A si zachovávají některé vlastnosti primárních hepatocytů, včetně schopnosti syntetizovat albumin a další sérové proteiny, což z nich činí cenný nástroj v hepatologickém výzkumu. Tyto buňky vykazují morfologii podobnou epitelu, jsou adherentní a mají vysokou rychlost růstu v kultuře.

Vědecký zájem o BRL-3A se rozšiřuje na jejich použití při studiu virových infekcí specifických pro játra, metabolismu léčiv a účinků různých růstových faktorů a cytokinů na jaterní buňky. Vědci rovněž využívají buňky BRL-3A ke zkoumání vlivu toxinů a karcinogenů na funkci jater, což jim umožňuje nahlédnout do problematiky hepatokarcinogeneze a poškození jater. Je známo, že buňky reagují na peroxizomové proliferátory a byly použity k testování účinnosti a bezpečnosti léčivých přípravků, které mohou ovlivnit funkci jater.

Navzdory své univerzálnosti však musí uživatelé buněčné linie BRL-3A vzít v úvahu omezení, která jsou vlastní nehumánnímu modelu, protože výsledky se nemusí vždy přímo promítnout do fyziologie lidských jater. Tento faktor podtrhuje důležitost potvrzení zjištění pomocí dalších modelů a experimentálních přístupů.

Tkáň
Játra
Synonyma
  • BRL3A
  • BRL 3A
  • Buffalo Rat Liver-3A

02Klasifikace

Organismus
Krysa
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Identifikátory

Citace
BRL-3A (katalogové číslo Cytion 500129)
Daňové identifikační číslo NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0606

04Exprese a náchylnost

Produkty
Multiplikační stimulační aktivita (MSA).

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilní glutamin, w: 1,0 mM pyruvát sodný, w: 1,1 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820600a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
Doporučená hustota osiva je 1 x 104 buněk/cm2.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.