İçeriğe atla
BRL-3A
Doku
Karaciğer
Eş anlamlılar
BRL3A, BRL 3A, Buffalo Rat Liver-3A

BRL-3A

Cell line · Ürün numarası 500129

The BRL-3A cell line is derived from the normal liver of a male Buffalo rat. Established in 1976, this cell line is an important in vitro model primarily ...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

BRL-3A hücre hattı, erkek Buffalo sıçanının normal karaciğerinden türetilmiştir. 1976 yılında kurulan bu hücre hattı, öncelikle hepatosit fonksiyonu, karaciğer rejenerasyon mekanizmaları ve hepatotoksisiteyi incelemek için kullanılan önemli bir in vitro modeldir. BRL-3A hücreleri, albümin ve diğer serum proteinlerini sentezleme yeteneği de dahil olmak üzere birincil hepatositlerin çeşitli özelliklerini korur ve bu da onları hepatolojik araştırmalarda değerli bir araç haline getirir. Bu hücreler epitel benzeri bir morfoloji sergiler ve kültürde yüksek büyüme oranıyla yapışıktır.

BRL-3A'ya olan bilimsel ilgi, karaciğere özgü viral enfeksiyonlar, ilaç metabolizması ve çeşitli büyüme faktörleri ile sitokinlerin karaciğer hücreleri üzerindeki etkilerinin incelenmesine kadar uzanmaktadır. Araştırmacılar ayrıca toksinlerin ve karsinojenlerin karaciğer fonksiyonu üzerindeki etkisini araştırmak için BRL-3A hücrelerini kullanarak hepatokarsinogenez ve karaciğer hasarı hakkında içgörü sağlamaktadır. Hücrelerin peroksizom proliferatörlerine yanıt verdiği bilinmektedir ve karaciğer fonksiyonunu potansiyel olarak etkileyen farmasötiklerin etkinliğini ve güvenliğini test etmek için kullanılmıştır.

Bununla birlikte, çok yönlülüklerine rağmen, BRL-3A hücre hattı kullanıcıları, sonuçlar her zaman doğrudan insan karaciğer fizyolojisine çevrilemeyebileceğinden, insan dışı bir modelin doğasında bulunan sınırlamaları göz önünde bulundurmalıdır. Bu faktör, bulguların ek modeller ve deneysel yaklaşımlarla desteklenmesinin önemini vurgulamaktadır.

Doku
Karaciğer
Eş anlamlılar
  • BRL3A
  • BRL 3A
  • Buffalo Rat Liver-3A

02Sınıflandırma

Canlı
Sıçan
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
BRL-3A (Cytion katalog numarası 500129)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10116
Cellosaurus
CVCL_0606

04İfade ve duyarlılık

Ürünler
Çarpma uyarıcı faaliyet (MSA).

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
Ham's F12, w: 1.0 mM stabil Glutamin, w: 1.0 mM Sodyum piruvat, w: 1.1 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820600a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 x 104 hücre/cm2 tohumlama yoğunluğu önerilir.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra, hücreleri 5 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 24 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.