Ga naar de inhoud
BRL-3A
Weefsel
Lever
Synoniemen
BRL3A, BRL 3A, Buffalo Rat Liver-3A

Documenten

BRL-3A

Cell line · Productnummer 500129

The BRL-3A cell line is derived from the normal liver of a male Buffalo rat. Established in 1976, this cell line is an important in vitro model primarily ...

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De BRL-3A cellijn is afgeleid van de normale lever van een mannelijke Buffalo rat. Deze cellijn werd in 1976 ontwikkeld en is een belangrijk in vitro model dat voornamelijk wordt gebruikt voor het bestuderen van de hepatocytenfunctie, leverregeneratiemechanismen en hepatotoxiciteit. BRL-3A cellen behouden verschillende kenmerken van primaire hepatocyten, waaronder het vermogen om albumine en andere serumeiwitten te synthetiseren, waardoor ze een waardevol hulpmiddel zijn bij hepatologisch onderzoek. Deze cellen vertonen een epitheliale morfologie en zijn adherent met een hoge groeisnelheid in cultuur.

De wetenschappelijke interesse in BRL-3A strekt zich uit tot de toepassing in de studie van leverspecifieke virale infecties, medicijnmetabolisme en de effecten van verschillende groeifactoren en cytokinen op levercellen. Onderzoekers gebruiken BRL-3A cellen ook om de invloed van gifstoffen en kankerverwekkende stoffen op de leverfunctie te onderzoeken, waardoor ze inzicht krijgen in hepatocarcinogenese en leverschade. Van de cellen is bekend dat ze reageren op peroxisome proliferators en ze worden gebruikt om de werkzaamheid en veiligheid te testen van geneesmiddelen die de leverfunctie kunnen beïnvloeden.

Ondanks hun veelzijdigheid moeten gebruikers van de BRL-3A cellijn echter rekening houden met de beperkingen die inherent zijn aan een niet-menselijk model, aangezien de resultaten niet altijd direct kunnen worden vertaald naar de menselijke leverfysiologie. Dit onderstreept het belang van het bevestigen van bevindingen met aanvullende modellen en experimentele benaderingen.

Weefsel
Lever
Synoniemen
  • BRL3A
  • BRL 3A
  • Buffalo Rat Liver-3A

02Classificatie

Organisme
Rat
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Identificatiegegevens

Bronvermelding
BRL-3A (Cytion catalogusnummer 500129)
NCBI-belastingnummer
10116
Cellosaurus
CVCL_0606

04Expressie en vatbaarheid

Producten
Vermenigvuldigingsstimulerende activiteit (MSA).

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabiele Glutamine, w: 1,0 mM natriumpyruvaat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820600a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
Een zaaidichtheid van 1 x 104 cellen/cm2 wordt aanbevolen.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 5 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.