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BRL-3A
Gewebe
Leber
Synonyme
BRL3A, BRL 3A, Buffalo Rat Liver-3A

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BRL-3A

Cell line · Artikelnummer 500129

The BRL-3A cell line is derived from the normal liver of a male Buffalo rat. Established in 1976, this cell line is an important in vitro model primarily ...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie BRL-3A wird aus der normalen Leber einer männlichen Büffelratte gewonnen. Diese Zelllinie wurde 1976 eingeführt und ist ein wichtiges In-vitro-Modell, das vor allem zur Untersuchung der Hepatozytenfunktion, der Leberregenerationsmechanismen und der Hepatotoxizität verwendet wird. BRL-3A-Zellen weisen mehrere Merkmale von primären Hepatozyten auf, darunter die Fähigkeit, Albumin und andere Serumproteine zu synthetisieren, was sie zu einem wertvollen Instrument in der hepatologischen Forschung macht. Diese Zellen weisen eine epithelähnliche Morphologie auf und sind adhärent mit einer hohen Wachstumsrate in Kultur.

Das wissenschaftliche Interesse an BRL-3A erstreckt sich auf die Untersuchung von leberspezifischen Virusinfektionen, des Arzneimittelstoffwechsels und der Auswirkungen verschiedener Wachstumsfaktoren und Zytokine auf Leberzellen. Forscher nutzen BRL-3A-Zellen auch, um die Auswirkungen von Toxinen und Karzinogenen auf die Leberfunktion zu untersuchen, was Einblicke in die Hepatokarzinogenese und Leberschädigung ermöglicht. Es ist bekannt, dass die Zellen auf Peroxisom-Proliferatoren reagieren, und sie wurden verwendet, um die Wirksamkeit und Sicherheit von Arzneimitteln zu testen, die die Leberfunktion beeinträchtigen könnten.

Trotz ihrer Vielseitigkeit müssen Nutzer der BRL-3A-Zelllinie jedoch die Einschränkungen berücksichtigen, die einem nicht-menschlichen Modell innewohnen, da sich die Ergebnisse nicht immer direkt auf die menschliche Leberphysiologie übertragen lassen. Dieser Faktor unterstreicht, wie wichtig es ist, die Ergebnisse mit zusätzlichen Modellen und experimentellen Ansätzen zu untermauern.

Gewebe
Leber
Synonyme
  • BRL3A
  • BRL 3A
  • Buffalo Rat Liver-3A

02Klassifizierung

Organismus
Ratte
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Bezeichner

Quellenangabe
BRL-3A (Cytion-Katalognummer 500129)
NCBI-Steuer-ID
10116
Cellosaurus
CVCL_0606

04Expression und Anfälligkeit

Produkte
Multiplikationsstimulierende Aktivität (MSA).

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabiles Glutamin, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820600a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
Es wird eine Aussaatdichte von 1 x 104 Zellen/cm2 empfohlen.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und adhärieren lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.