Премини към съдържанието
BRL-3A
Тъкан
Черен дроб
Синоними
BRL3A, BRL 3A, Buffalo Rat Liver-3A

Документи

BRL-3A

Cell line · Номер на продукта 500129

The BRL-3A cell line is derived from the normal liver of a male Buffalo rat. Established in 1976, this cell line is an important in vitro model primarily ...

€430.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия BRL-3A е получена от нормален черен дроб на мъжки плъх от вида Бъфало. Създадена през 1976 г., тази клетъчна линия е важен in vitro модел, използван предимно за изследване на функцията на хепатоцитите, механизмите на чернодробна регенерация и хепатотоксичността. Клетките BRL-3A запазват някои характеристики на първичните хепатоцити, включително способността да синтезират албумин и други серумни протеини, което ги прави ценен инструмент в хепатологичните изследвания. Тези клетки имат епителиално-подобна морфология и са адхезивни с висока скорост на растеж в култура.

Научният интерес към BRL-3A се разпростира върху приложението му при изучаването на специфични за черния дроб вирусни инфекции, лекарствения метаболизъм и въздействието на различни растежни фактори и цитокини върху чернодробните клетки. Изследователите използват BRL-3A клетките и за изследване на влиянието на токсини и канцерогени върху чернодробната функция, което дава представа за хепатокарциногенезата и увреждането на черния дроб. Известно е, че клетките реагират на пероксизомни пролифератори и се използват за тестване на ефикасността и безопасността на фармацевтични продукти, които могат да повлияят на чернодробната функция.

Въпреки тяхната универсалност обаче потребителите на клетъчната линия BRL-3A трябва да вземат предвид ограниченията, присъщи на нечовешкия модел, тъй като резултатите невинаги могат да се пренесат директно към физиологията на човешкия черен дроб. Този фактор подчертава важността на потвърждаването на резултатите с допълнителни модели и експериментални подходи.

Тъкан
Черен дроб
Синоними
  • BRL3A
  • BRL 3A
  • Buffalo Rat Liver-3A

02Класификация

Организъм
Плъх
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Идентификатори

Източник
BRL-3A (каталожен номер 500129 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10116
Целозавър
CVCL_0606

04Проява и предразположеност

Продукти
Стимулираща размножаването дейност (MSA).

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
Ham's F12, w: 1,0 mM стабилен глутамин, w: 1,0 mM натриев пируват, w: 1,1 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820600a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
Препоръчва се плътност на засяване от 1 x 104 клетки/cm2.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
След размразяване, поставете клетките в плаки с плътност 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за най-малко 24 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.