Gå til innholdet
BRL-3A
Vev
Lever
Synonymer
BRL3A, BRL 3A, Buffalo Rat Liver-3A

Dokumenter

BRL-3A

Cell line · Produktnummer 500129

The BRL-3A cell line is derived from the normal liver of a male Buffalo rat. Established in 1976, this cell line is an important in vitro model primarily ...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

BRL-3A-cellelinjen er avledet fra den normale leveren til en Buffalo-hannrotte. Denne cellelinjen ble etablert i 1976, og er en viktig in vitro-modell som først og fremst brukes til å studere hepatocyttfunksjon, mekanismer for leverregenerering og hepatotoksisitet. BRL-3A-celler har flere av de samme egenskapene som primære hepatocytter, blant annet evnen til å syntetisere albumin og andre serumproteiner, noe som gjør dem til et verdifullt verktøy i hepatologisk forskning. Disse cellene har en epitel-lignende morfologi og er adherente med høy veksthastighet i kultur.

Den vitenskapelige interessen for BRL-3A strekker seg til studier av leverspesifikke virusinfeksjoner, legemiddelmetabolisme og effekten av ulike vekstfaktorer og cytokiner på leverceller. Forskere bruker også BRL-3A-celler til å undersøke effekten av giftstoffer og kreftfremkallende stoffer på leverfunksjonen, noe som gir innsikt i hepatokarsinogenese og leverskade. Cellene er kjent for å reagere på peroksisomproliferatorer og har blitt brukt til å teste effekten og sikkerheten til legemidler som potensielt kan påvirke leverfunksjonen.

Til tross for cellelinjens allsidighet må brukere av BRL-3A-cellelinjen ta hensyn til begrensningene som ligger i en ikke-human modell, ettersom resultatene ikke alltid kan overføres direkte til leverfysiologien hos mennesker. Dette understreker hvor viktig det er å underbygge funnene med andre modeller og eksperimentelle tilnærminger.

Vev
Lever
Synonymer
  • BRL3A
  • BRL 3A
  • Buffalo Rat Liver-3A

02Klassifisering

Organisme
Rotte
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Identifikatorer

Kildehenvisning
BRL-3A (Cytion katalognummer 500129)
NCBI-skattenummer
10116
Cellosaurus
CVCL_0606

04Uttrykk og mottakelighet

Produkter
Multiplikasjonsstimulerende aktivitet (MSA).

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
Ham's F12, m: 1,0 mM stabil glutamin, m: 1,0 mM natriumpyruvat, m: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820600a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
Det anbefales en såtetthet på 1 x 104 celler/cm2.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.