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BRL-3A
Pañuelo de papel
Hígado
Sinónimos
BRL3A, BRL 3A, Buffalo Rat Liver-3A

Documentos

BRL-3A

Cell line · Número de producto 500129

The BRL-3A cell line is derived from the normal liver of a male Buffalo rat. Established in 1976, this cell line is an important in vitro model primarily ...

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01Información general

Descripción

La línea celular BRL-3A se deriva del hígado normal de una rata macho Buffalo. Creada en 1976, esta línea celular es un importante modelo in vitro utilizado principalmente para estudiar la función de los hepatocitos, los mecanismos de regeneración hepática y la hepatotoxicidad. Las células BRL-3A conservan varias características de los hepatocitos primarios, incluida la capacidad de sintetizar albúmina y otras proteínas séricas, lo que las convierte en una valiosa herramienta para la investigación hepatológica. Estas células presentan una morfología similar a la epitelial y son adherentes con una elevada tasa de crecimiento en cultivo.

El interés científico por las BRL-3A se extiende a su aplicación en el estudio de infecciones víricas específicas del hígado, el metabolismo de fármacos y los efectos de diversos factores de crecimiento y citocinas en las células hepáticas. Los investigadores también utilizan las células BRL-3A para estudiar el impacto de toxinas y carcinógenos en la función hepática, lo que permite comprender mejor la hepatocarcinogénesis y las lesiones hepáticas. Se sabe que las células responden a los proliferadores de peroxisomas y se han utilizado para probar la eficacia y seguridad de fármacos que pueden afectar a la función hepática.

Sin embargo, a pesar de su versatilidad, los usuarios de la línea celular BRL-3A deben tener en cuenta las limitaciones inherentes a un modelo no humano, ya que los resultados no siempre pueden trasladarse directamente a la fisiología hepática humana. Este factor subraya la importancia de corroborar los hallazgos con modelos y enfoques experimentales adicionales.

Pañuelo de papel
Hígado
Sinónimos
  • BRL3A
  • BRL 3A
  • Buffalo Rat Liver-3A

02Clasificación

Organismo
Rata
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Identificadores

Referencia
BRL-3A (número de catálogo 500129 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0606

04Expresión y susceptibilidad

Productos
Actividad estimulante de la multiplicación (MSA).

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
Ham's F12, w: 1,0 mM Glutamina estable, w: 1,0 mM Piruvato sódico, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion número de artículo 820600a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
Se recomienda una densidad de siembra de 1 x 104 células/cm2.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.