Prejsť na obsah
BRL-3A
Tkanivo
Pečeň
Synonymá
BRL3A, BRL 3A, Buffalo Rat Liver-3A

Dokumenty

BRL-3A

Cell line · Číslo výrobku 500129

The BRL-3A cell line is derived from the normal liver of a male Buffalo rat. Established in 1976, this cell line is an important in vitro model primarily ...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia BRL-3A je odvodená z normálnej pečene samca potkana Buffalo. Táto bunková línia bola založená v roku 1976 a je dôležitým modelom in vitro, ktorý sa používa najmä na štúdium funkcie hepatocytov, mechanizmov regenerácie pečene a hepatotoxicity. Bunky BRL-3A si zachovávajú niekoľko vlastností primárnych hepatocytov vrátane schopnosti syntetizovať albumín a iné sérové proteíny, čo z nich robí cenný nástroj v hepatologickom výskume. Tieto bunky vykazujú morfológiu podobnú epitelu a sú adherentné s vysokou rýchlosťou rastu v kultúre.

Vedecký záujem o BRL-3A sa rozširuje na ich použitie pri štúdiu vírusových infekcií špecifických pre pečeň, metabolizmu liekov a účinkov rôznych rastových faktorov a cytokínov na pečeňové bunky. Výskumníci využívajú bunky BRL-3A aj na skúmanie vplyvu toxínov a karcinogénov na funkciu pečene, čo im poskytuje poznatky o hepatokarcinogenéze a poškodení pečene. Bunky sú známe tým, že reagujú na peroxizómové proliferátory a používajú sa na testovanie účinnosti a bezpečnosti farmaceutických prípravkov, ktoré môžu ovplyvniť funkciu pečene.

Napriek svojej univerzálnosti však musia používatelia bunkovej línie BRL-3A brať do úvahy obmedzenia spojené s modelom, ktorý nie je ľudský, keďže výsledky sa nemusia vždy priamo prejaviť vo fyziológii ľudskej pečene. Tento faktor zdôrazňuje dôležitosť potvrdenia zistení pomocou ďalších modelov a experimentálnych prístupov.

Tkanivo
Pečeň
Synonymá
  • BRL3A
  • BRL 3A
  • Buffalo Rat Liver-3A

02Klasifikácia

Organizmus
Potkan
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Identifikátory

Citácia
BRL-3A (katalógové číslo Cytion 500129)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0606

04Prejav a náchylnosť

Produkty
Multiplikačná stimulačná aktivita (MSA).

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilný glutamín, w: 1,0 mM pyruvát sodný, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion číslo výrobku 820600a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
Odporúča sa hustota výsevu 1 x 104 buniek/cm2.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky v koncentrácii 5 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilnúť aspoň 24 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.