Aller directement au contenu
CDNR4
Tissu
Sein
Maladie
Adénocarcinome

Documents

CDNR4

Cell line · Référence du produit 400391

The CDNR4 cell line comprises a specialized subset originating from the COMMA-D cell line, known for modeling mouse mammary carcinoma. This clonal subpopu...

€800.00hors taxes et frais de port
En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire CDNR4 comprend un sous-ensemble spécialisé provenant de la lignée cellulaire COMMA-D, connue pour modéliser le carcinome mammaire de la souris. Cette sous-population clonale a fait l'objet d'une caractérisation approfondie, révélant une série de propriétés et de fonctionnalités uniques. L'une des caractéristiques les plus frappantes des cellules CDNR4 est leur ressemblance avec les cellules souches mammaires, ce qui en fait une ressource importante pour l'exploration des aspects de la biologie des cellules souches, de la carcinogenèse et de l'hétérogénéité cellulaire au sein des populations. Ces cellules ont été développées par transfection d'un transposon portant des gènes de résistance à la kanamycine et à la néomycine (gène Tn5), ce qui a conduit à l'émergence de diverses caractéristiques et capacités intrigantes, notamment leur potentiel de différenciation dans des phénotypes prénéoplasiques et néoplasiques.

Issu de la lignée COMMA-D, qui a été initialement étudiée pour son hétérogénéité cellulaire à l'aide de diverses techniques telles que la microscopie à contraste de phase, la coloration immunocytochimique, l'analyse du contenu en ADN et l'évaluation du potentiel oncogène, CDNR4 se distingue en tant que clone distinct. Grâce à des méthodes spécifiques de transfection et de sélection, des sous-populations clonales comme CDNR4 ont été isolées, chacune conservant un certain degré d'hétérogénéité observé dans les cellules parentales COMMA-D d'origine. Ce maintien de l'hétérogénéité souligne la nature complexe de ces populations cellulaires et renforce la valeur des cellules CDNR4 dans la recherche axée sur la différenciation cellulaire et la progression du cancer.

Tissu
Sein
Maladie
Adénocarcinome

02Classification

Organisme
Souris
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Identifiants

Référence
CDNR4 (numéro de catalogue 400391 de Cytion)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5719

04Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
2 x 104 cellules/cm2 est recommandé
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Récupération après le dégel
Après décongélation, ensemencer les cellules à raison de 5 x 104 cellules/cm2 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

06Donateur

Âge du donneur
1 an