Siirry sisältöön
CDNR4
Kudos
Rinta
Sairaus
Adenokarsinooma

Asiakirjat

CDNR4

Cell line · Tuotenumero 400391

The CDNR4 cell line comprises a specialized subset originating from the COMMA-D cell line, known for modeling mouse mammary carcinoma. This clonal subpopu...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

CDNR4-solulinja koostuu erikoistuneesta alaryhmästä, joka on peräisin COMMA-D-solulinjasta, joka on tunnettu hiiren rintarauhaskarsinooman mallintamisesta. Tämä klooninen alipopulaatio on karakterisoitu laajasti, mikä on paljastanut useita ainutlaatuisia ominaisuuksia ja toiminnallisuuksia. Yksi CDNR4-solujen silmiinpistävimmistä piirteistä on niiden samankaltaisuus maitorauhasen kantasolujen kanssa, mikä tekee niistä merkittävän resurssin kantasolubiologian, karsinogeneesin ja populaatioiden sisäisen solujen heterogeenisuuden tutkimiseen. Nämä solut kehitettiin transfektoimalla kanamysiini- ja neomysiiniresistenssigeenejä sisältävä transposoni (Tn5-geeni), mikä johti erilaisten kiehtovien ominaisuuksien ja kykyjen kehittymiseen, mukaan lukien niiden kyky erilaistua sekä preneoplastisiin että neoplastisiin fenotyyppeihin.

CDNR4 on peräisin COMMA-D-linjasta, jonka solujen heterogeenisuutta tutkittiin alun perin erilaisilla tekniikoilla, kuten faasikontrastimikroskoopialla, immunosytokemiallisella värjäyksellä, DNA:n sisällön analyysillä ja onkogeenisen potentiaalin arvioinnilla. Spesifisillä transfektio- ja valintamenetelmillä eristettiin CDNR4:n kaltaisia klonaalisia alipopulaatioita, joista jokainen säilytti jonkin verran alkuperäisissä COMMA-D-alkuperäsoluissa havaittua heterogeenisuutta. Tämä heterogeenisuuden säilyminen korostaa näiden solupopulaatioiden monimutkaista luonnetta ja lisää CDNR4-solujen arvoa solujen erilaistumiseen ja syövän etenemiseen keskittyvässä tutkimuksessa.

Kudos
Rinta
Sairaus
Adenokarsinooma

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Tunnisteet

Lähdeviite
CDNR4 (Cytionin luettelonumero 400391)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_5719

04Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
Suositellaan 2 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

06Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
1 vuosi