Pāriet uz saturu
CDNR4
Audums
Krūtis
Slimība
Adenokarcinoma

Dokumenti

CDNR4

Cell line · Preces numurs 400391

The CDNR4 cell line comprises a specialized subset originating from the COMMA-D cell line, known for modeling mouse mammary carcinoma. This clonal subpopu...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

CDNR4 šūnu līnija ir specializēta apakšgrupa, kas iegūta no COMMA-D šūnu līnijas, kura ir pazīstama kā peļu krūts karcinomas modelis. Šī klonu subpopulācija ir plaši raksturota, atklājot virkni unikālu īpašību un funkcionalitātes. Viena no spilgtākajām CDNR4 šūnu iezīmēm ir to līdzība ar piena dziedzera cilmes šūnām, kas tās padara par nozīmīgu resursu cilmes šūnu bioloģijas, kancerogēnozes un šūnu heterogenitātes populāciju ietvaros izpētei. Šīs šūnas tika izveidotas, transfekējot transpozonu ar kanamicīna un neomicīna rezistences gēniem (Tn5 gēnu), kas izraisīja dažādu intriģējošu īpašību un spēju parādīšanos, tostarp to potenciālu diferencēties gan pirmsneoplastiskos, gan neoplastiskos fenotipos.

CDNR4 izriet no COMMA-D līnijas, kuras šūnu heterogenitāte sākotnēji tika pētīta, izmantojot dažādas metodes, piemēram, fāzu kontrasta mikroskopiju, imunocitoķīmisko krāsošanu, DNS satura analīzi un onkogēnā potenciāla novērtēšanu, un CDNR4 izceļas kā īpašs klons. Izmantojot īpašas transfekcijas un selekcijas metodes, tika izolētas tādas klonu subpopulācijas kā CDNR4, no kurām katra saglabāja zināmu heterogenitātes pakāpi, kāda bija vērojama sākotnējās COMMA-D vecāku šūnās. Šī heterogenitātes saglabāšana uzsver šo šūnu populāciju sarežģīto raksturu un palielina CDNR4 šūnu vērtību pētījumos, kas vērsti uz šūnu diferenciāciju un vēža progresēšanu.

Audums
Krūtis
Slimība
Adenokarcinoma

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Identifikatori

Atsauce
CDNR4 (Cytion kataloga numurs 400391)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_5719

04Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
Ieteicams 2 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

06Ziedotājs

Donora vecums
1 gads