Přejít na obsah
CDNR4
Tkáň
Prsa
Nemoc
Adenokarcinom

Dokumenty

CDNR4

Cell line · Číslo výrobku 400391

The CDNR4 cell line comprises a specialized subset originating from the COMMA-D cell line, known for modeling mouse mammary carcinoma. This clonal subpopu...

€800.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie CDNR4 zahrnuje specializovanou podskupinu pocházející z buněčné linie COMMA-D, která je známá jako model myšího karcinomu prsu. Tato klonální subpopulace byla podrobena rozsáhlé charakterizaci, která odhalila řadu jedinečných vlastností a funkcí. Jedním z nejvýraznějších rysů buněk CDNR4 je jejich podobnost s mamárními kmenovými buňkami, což je staví do pozice významného zdroje pro zkoumání aspektů biologie kmenových buněk, karcinogeneze a buněčné heterogenity v rámci populací. Tyto buňky byly vyvinuty transfekcí transpozonu nesoucího geny rezistence vůči kanamycinu a neomycinu (gen Tn5), což vedlo ke vzniku různých zajímavých vlastností a schopností, včetně jejich potenciálu diferencovat se do preneoplastických i neoplastických fenotypů.

Klon CDNR4, který pochází z linie COMMA-D, jež byla původně studována pro svou buněčnou heterogenitu pomocí různých technik, jako je mikroskopie s fázovým kontrastem, imunocytochemické barvení, analýza obsahu DNA a hodnocení onkogenního potenciálu, vyniká jako odlišný klon. Pomocí specifických metod transfekce a selekce byly izolovány klonální subpopulace jako CDNR4, z nichž každá si zachovává určitý stupeň heterogenity pozorované u původních rodičovských buněk COMMA-D. Toto zachování heterogenity podtrhuje komplexní povahu těchto buněčných populací a zvyšuje hodnotu buněk CDNR4 ve výzkumu zaměřeném na buněčnou diferenciaci a progresi rakoviny.

Tkáň
Prsa
Nemoc
Adenokarcinom

02Klasifikace

Organismus
Myš
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Identifikátory

Citace
CDNR4 (katalogové číslo Cytion 400391)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5719

04Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
Doporučuje se 2 x 104 buněk/cm2.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

06Dárce

Věk dárce
1 rok