İçeriğe atla
CDNR4
Doku
Meme
Hastalık
Adenokarsinom

CDNR4

Cell line · Ürün numarası 400391

The CDNR4 cell line comprises a specialized subset originating from the COMMA-D cell line, known for modeling mouse mammary carcinoma. This clonal subpopu...

€800.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
1

01Genel bilgiler

Açıklama

CDNR4 hücre hattı, fare meme karsinomunu modellemesiyle bilinen COMMA-D hücre hattından kaynaklanan özel bir alt kümeden oluşur. Bu klonal alt popülasyon, bir dizi benzersiz özellik ve işlevselliği ortaya çıkaran kapsamlı bir karakterizasyondan geçmiştir. CDNR4 hücrelerinin en çarpıcı özelliklerinden biri, meme kök hücrelerine benzerlikleridir; bu da onları kök hücre biyolojisi, karsinogenez ve popülasyonlar içindeki hücresel heterojenliğin yönlerini araştırmak için önemli bir kaynak olarak konumlandırmaktadır. Bu hücreler, kanamisin ve neomisin direnç genlerini (Tn5 geni) taşıyan bir transpozonun transfeksiyonu yoluyla geliştirilmiş ve bu da hem preneoplastik hem de neoplastik fenotiplere farklılaşma potansiyelleri de dahil olmak üzere çeşitli ilgi çekici özelliklerin ve yeteneklerin ortaya çıkmasına yol açmıştır.

Başlangıçta faz kontrast mikroskopisi, immünositokimyasal boyama, DNA içerik analizi ve onkojenik potansiyel değerlendirmeleri gibi çeşitli teknikler kullanılarak hücresel heterojenliği açısından incelenen COMMA-D hattından kaynaklanan CDNR4, farklı bir klon olarak öne çıkmaktadır. Spesifik transfeksiyon ve seleksiyon yöntemleri sayesinde, CDNR4 gibi klonal alt popülasyonlar izole edilmiş ve her biri orijinal COMMA-D ebeveyn hücrelerinde görülen heterojenliği bir dereceye kadar korumuştur. Bu heterojenliğin korunması, bu hücre popülasyonlarının karmaşık doğasının altını çizmekte ve hücresel farklılaşma ve kanser ilerlemesine odaklanan araştırmalarda CDNR4 hücrelerinin değerini artırmaktadır.

Doku
Meme
Hastalık
Adenokarsinom

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
CDNR4 (Cytion katalog numarası 400391)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_5719

04İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
2 x 104 hücre/cm2 önerilir
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra, hücreleri 5 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 24 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

06Bağışçı

Bağışçının yaşı
1 yıl