Przejdź do treści
CDNR4
Chusteczka
Pierś
Choroba
Gruczolakorak

Dokumenty

CDNR4

Cell line · Numer produktu 400391

The CDNR4 cell line comprises a specialized subset originating from the COMMA-D cell line, known for modeling mouse mammary carcinoma. This clonal subpopu...

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa CDNR4 obejmuje wyspecjalizowany podzbiór pochodzący z linii komórkowej COMMA-D, znanej z modelowania mysiego raka sutka. Ta klonalna subpopulacja została poddana szeroko zakrojonej charakterystyce, ujawniając szereg unikalnych właściwości i funkcji. Jedną z najbardziej uderzających cech komórek CDNR4 jest ich podobieństwo do komórek macierzystych sutka, co czyni je istotnym źródłem do badania aspektów biologii komórek macierzystych, kancerogenezy i heterogeniczności komórkowej w populacjach. Komórki te zostały opracowane poprzez transfekcję transpozonu zawierającego geny oporności na kanamycynę i neomycynę (gen Tn5), co doprowadziło do pojawienia się różnych intrygujących cech i możliwości, w tym ich potencjału do różnicowania się zarówno w fenotypy przednowotworowe, jak i nowotworowe.

Pochodzący z linii COMMA-D, która początkowo była badana pod kątem heterogeniczności komórkowej przy użyciu różnych technik, takich jak mikroskopia z kontrastem fazowym, barwienie immunocytochemiczne, analiza zawartości DNA i ocena potencjału onkogennego, CDNR4 wyróżnia się jako odrębny klon. Poprzez specyficzną transfekcję i metody selekcji wyizolowano subpopulacje klonalne, takie jak CDNR4, z których każda zachowuje pewien stopień heterogeniczności obserwowany w oryginalnych komórkach rodzicielskich COMMA-D. To zachowanie heterogeniczności podkreśla złożoną naturę tych populacji komórek i zwiększa wartość komórek CDNR4 w badaniach koncentrujących się na różnicowaniu komórkowym i progresji raka.

Chusteczka
Pierś
Choroba
Gruczolakorak

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Identyfikatory

Źródło
CDNR4 (numer katalogowy Cytion 400391)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5719

04Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
Zalecane jest 2 x 104 komórek/cm2.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

06Darczyńca

Wiek dawcy
1 rok