Ir diretamente para o conteúdo
CDNR4
Tecido
Peito
Doença
Adenocarcinoma

Documentos

CDNR4

Cell line · Número do produto 400391

The CDNR4 cell line comprises a specialized subset originating from the COMMA-D cell line, known for modeling mouse mammary carcinoma. This clonal subpopu...

€800.00sem impostos nem portes de envio
Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular CDNR4 compreende um subconjunto especializado originário da linha celular COMMA-D, conhecida por modelar o carcinoma mamário do rato. Esta subpopulação clonal foi submetida a uma extensa caraterização, revelando uma série de propriedades e funcionalidades únicas. Uma das caraterísticas mais marcantes das células CDNR4 é a sua semelhança com as células estaminais mamárias, o que as posiciona como um recurso significativo para explorar aspectos da biologia das células estaminais, da carcinogénese e da heterogeneidade celular nas populações. Estas células foram desenvolvidas através da transfecção de um transposão com genes de resistência à canamicina e à neomicina (gene Tn5), o que levou ao aparecimento de várias caraterísticas e capacidades intrigantes, incluindo o seu potencial para se diferenciarem em fenótipos pré-neoplásicos e neoplásicos.

Originário da linha COMMA-D, que foi inicialmente estudada pela sua heterogeneidade celular utilizando uma variedade de técnicas, tais como microscopia de contraste de fase, coloração imunocitoquímica, análise do conteúdo de ADN e avaliações do potencial oncogénico, o CDNR4 destaca-se como um clone distinto. Através de métodos específicos de transfecção e seleção, foram isoladas subpopulações clonais como a CDNR4, mantendo cada uma delas um certo grau de heterogeneidade observado nas células parentais COMMA-D originais. Esta retenção da heterogeneidade sublinha a natureza complexa destas populações celulares e aumenta o valor das células CDNR4 na investigação centrada na diferenciação celular e na progressão do cancro.

Tecido
Peito
Doença
Adenocarcinoma

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Identificadores

Referência
CDNR4 (número de catálogo Cytion 400391)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5719

04Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
Recomenda-se 2 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

06Doador

Idade do dador
1 ano