Mine otse sisu juurde
CDNR4
Kude
Rind
Haigus
Adenokartsinoom

Dokumendid

CDNR4

Cell line · Toote number 400391

The CDNR4 cell line comprises a specialized subset originating from the COMMA-D cell line, known for modeling mouse mammary carcinoma. This clonal subpopu...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

CDNR4 rakuliin koosneb spetsiaalsest alamrühmast, mis pärineb COMMA-D rakuliinist, mis on tuntud hiire rinnanäärme kartsinoomi modelleerimiseks. See klooniline alampopulatsioon on läbinud ulatusliku iseloomustuse, mis on paljastanud mitmeid unikaalseid omadusi ja funktsioone. CDNR4 rakkude üks silmatorkavamaid omadusi on nende sarnasus rinnanäärme tüvirakkudega, mis muudab nad oluliseks ressursiks tüvirakkude bioloogia, kantserogeneesi ja rakkude heterogeensuse aspektide uurimisel populatsioonides. Need rakud arenesid kanamütsiini ja neomütsiini resistentsuse geene (Tn5 geen) kandva transposooni transfektsiooni abil, mis tõi kaasa mitmesuguseid intrigeerivaid omadusi ja võimeid, sealhulgas nende potentsiaali diferentseeruda nii preneoplastilisteks kui ka neoplastilisteks fenotüüpideks.

CDNR4, mis pärineb COMMA-D liinist, mille rakkude heterogeensust uuriti algselt mitmesuguste tehnikate abil, nagu faasikontrastmikroskoopia, immunotsütokeemiline värvimine, DNA-sisalduse analüüs ja onkogeense potentsiaali hindamine, paistab silma kui eriline kloon. Spetsiifiliste transfektsiooni- ja selektsioonimeetodite abil isoleeriti CDNR4-suguseid klonaalseid alampopulatsioone, millest igaüks säilitas teatava osa algsetel COMMA-D vanemrakkudel täheldatud heterogeensusest. Selline heterogeensuse säilitamine rõhutab nende rakupopulatsioonide keerulist olemust ja suurendab CDNR4 rakkude väärtust rakkude diferentseerumise ja vähi progresseerumise uurimisel.

Kude
Rind
Haigus
Adenokartsinoom

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Tunnused

Viide
CDNR4 (Cytioni katalooginumber 400391)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_5719

04Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
Soovitatav on 2 x 104 rakku/cm2.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

06Annetaja

Doonori vanus
1 aasta