Pereiti prie turinio
CDNR4
Audinys
Krūtys
Liga
Adenokarcinoma

Dokumentai

CDNR4

Cell line · Prekės numeris 400391

The CDNR4 cell line comprises a specialized subset originating from the COMMA-D cell line, known for modeling mouse mammary carcinoma. This clonal subpopu...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
1

01Bendra informacija

Aprašymas

CDNR4 ląstelių liniją sudaro specializuotas pogrupis, kilęs iš COMMA-D ląstelių linijos, žinomos kaip pelės krūties karcinomos modelis. Ši klono subpopuliacija buvo išsamiai charakterizuota ir atskleidė daugybę unikalių savybių ir funkcijų. Vienas iš ryškiausių CDNR4 ląstelių bruožų yra jų panašumas į pieno liaukų kamienines ląsteles, todėl jos yra svarbus šaltinis tiriant kamieninių ląstelių biologijos, kancerogenezės ir ląstelių heterogeniškumo populiacijose aspektus. Šios ląstelės buvo sukurtos transpozono, turinčio atsparumo kanamicinui ir neomicinui genus (Tn5 genas), transfekcijos būdu, todėl atsirado įvairių intriguojančių savybių ir gebėjimų, įskaitant jų potencialą diferencijuotis ir į preneoplastinius, ir į neoplastinius fenotipus.

CDNR4, kilęs iš COMMA-D linijos, kurios ląstelių heterogeniškumas iš pradžių buvo tiriamas įvairiais metodais, pavyzdžiui, naudojant fazinio kontrasto mikroskopiją, imunocitocheminį dažymą, DNR turinio analizę ir onkogeninio potencialo vertinimą, išsiskiria kaip atskiras klonas. Taikant specialius transfekcijos ir atrankos metodus, buvo išskirtos tokios klonų subpopuliacijos kaip CDNR4, kurių kiekviena išlaikė tam tikrą heterogeniškumo laipsnį, pastebėtą pradinėse COMMA-D tėvinėse ląstelėse. Toks heterogeniškumo išsaugojimas pabrėžia sudėtingą šių ląstelių populiacijų prigimtį ir didina CDNR4 ląstelių vertę atliekant tyrimus, susijusius su ląstelių diferenciacija ir vėžio progresavimu.

Audinys
Krūtys
Liga
Adenokarcinoma

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Identifikatoriai

Nuoroda
CDNR4 (Cytion katalogo numeris 400391)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_5719

04Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
Rekomenduojama 2 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

06Donoras

Donoro amžius
1 metai