Preskoči na vsebino
CDNR4
Tkivo
Prsi
Bolezen
Adenokarcinom

Dokumenti

CDNR4

Cell line · Številka izdelka 400391

The CDNR4 cell line comprises a specialized subset originating from the COMMA-D cell line, known for modeling mouse mammary carcinoma. This clonal subpopu...

€800.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija CDNR4 vključuje specializirano podskupino, ki izhaja iz celične linije COMMA-D, znane po modeliranju mišjega karcinoma dojk. Ta klonska subpopulacija je bila obsežno karakterizirana, kar je razkrilo vrsto edinstvenih lastnosti in funkcionalnosti. Ena od najbolj presenetljivih značilnosti celic CDNR4 je njihova podobnost z matičnimi celicami dojk, zaradi česar so pomemben vir za raziskovanje vidikov biologije matičnih celic, karcinogeneze in celične heterogenosti znotraj populacij. Te celice so bile razvite s transfekcijo transpozona z geni za odpornost proti kanamicinu in neomicinu (gen Tn5), kar je privedlo do pojava različnih zanimivih lastnosti in sposobnosti, vključno z možnostjo diferenciacije v preneoplastične in neoplastične fenotipe.

CDNR4 izvira iz linije COMMA-D, ki je bila sprva preučevana zaradi svoje celične heterogenosti z različnimi tehnikami, kot so mikroskopija s faznim kontrastom, imunocitokemično barvanje, analiza vsebnosti DNK in ocene onkogenega potenciala, in se odlikuje kot poseben klon. S posebnimi metodami transfekcije in selekcije so bile izolirane klonske subpopulacije, kot je CDNR4, pri čemer je vsaka ohranila določeno stopnjo heterogenosti, ki je bila opažena pri prvotnih starševskih celicah COMMA-D. Ta ohranitev heterogenosti poudarja kompleksno naravo teh celičnih populacij in povečuje vrednost celic CDNR4 v raziskavah, osredotočenih na celično diferenciacijo in napredovanje raka.

Tkivo
Prsi
Bolezen
Adenokarcinom

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Identifikatorji

Navajanje vira
CDNR4 (kataloška številka Cytion 400391)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5719

04Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
Priporočljivo je 2 x 104 celic/cm2.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo, vsaj 24 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

06Donator

Starost darovalca
1 leto