Prejsť na obsah
CDNR4
Tkanivo
Prsia
Choroba
Adenokarcinóm

Dokumenty

CDNR4

Cell line · Číslo výrobku 400391

The CDNR4 cell line comprises a specialized subset originating from the COMMA-D cell line, known for modeling mouse mammary carcinoma. This clonal subpopu...

€800.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunkovú líniu CDNR4 tvorí špecializovaná podskupina pochádzajúca z bunkovej línie COMMA-D, ktorá je známa ako model myšieho karcinómu prsníka. Táto klonálna subpopulácia prešla rozsiahlou charakterizáciou, ktorá odhalila celý rad jedinečných vlastností a funkcií. Jednou z najvýraznejších vlastností buniek CDNR4 je ich podobnosť s kmeňovými bunkami prsníka, čo ich stavia do pozície významného zdroja na skúmanie aspektov biológie kmeňových buniek, karcinogenézy a bunkovej heterogenity v rámci populácií. Tieto bunky boli vyvinuté transfekciou transpozónu nesúceho gény rezistencie voči kanamycínu a neomycínu (gén Tn5), čo viedlo k vzniku rôznych zaujímavých vlastností a schopností vrátane ich potenciálu diferencovať sa do preneoplastických aj neoplastických fenotypov.

Klon CDNR4, ktorý pochádza z línie COMMA-D, ktorá bola pôvodne skúmaná z hľadiska bunkovej heterogenity pomocou rôznych techník, ako je mikroskopia s fázovým kontrastom, imunocytochemické farbenie, analýza obsahu DNA a hodnotenie onkogénneho potenciálu, vyniká ako osobitný klon. Prostredníctvom špecifických metód transfekcie a selekcie boli izolované klonálne subpopulácie ako CDNR4, pričom každá z nich si zachovala určitý stupeň heterogenity pozorovanej v pôvodných rodičovských bunkách COMMA-D. Toto zachovanie heterogenity zdôrazňuje komplexnú povahu týchto bunkových populácií a zvyšuje hodnotu buniek CDNR4 vo výskume zameranom na bunkovú diferenciáciu a progresiu rakoviny.

Tkanivo
Prsia
Choroba
Adenokarcinóm

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Identifikátory

Citácia
CDNR4 (katalógové číslo Cytion 400391)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5719

04Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
Odporúča sa 2 x 104 buniek/cm2.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky v koncentrácii 5 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilnúť aspoň 24 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

06Darca

Vek darcu
1 rok