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CDNR4
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Enfermedad
Adenocarcinoma

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CDNR4

Cell line · Número de producto 400391

The CDNR4 cell line comprises a specialized subset originating from the COMMA-D cell line, known for modeling mouse mammary carcinoma. This clonal subpopu...

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01Información general

Descripción

La línea celular CDNR4 comprende un subconjunto especializado procedente de la línea celular COMMA-D, conocida por modelar el carcinoma mamario de ratón. Esta subpoblación clonal ha sido ampliamente caracterizada, revelando una serie de propiedades y funcionalidades únicas. Una de las características más llamativas de las células CDNR4 es su parecido con las células madre mamarias, lo que las sitúa como un recurso importante para explorar aspectos de la biología de las células madre, la carcinogénesis y la heterogeneidad celular dentro de las poblaciones. Estas células se desarrollaron mediante la transfección de un transposón portador de genes de resistencia a la kanamicina y la neomicina (gen Tn5), lo que condujo a la aparición de varios rasgos y capacidades intrigantes, entre ellos su potencial para diferenciarse en fenotipos tanto preneoplásicos como neoplásicos.

Procedente de la línea COMMA-D, cuya heterogeneidad celular se estudió inicialmente mediante diversas técnicas como la microscopía de contraste de fases, la tinción inmunocitoquímica, el análisis del contenido de ADN y la evaluación del potencial oncogénico, CDNR4 destaca como un clon distinto. Mediante métodos específicos de transfección y selección, se aislaron subpoblaciones clonales como CDNR4, cada una de las cuales mantiene cierto grado de la heterogeneidad observada en las células parentales COMMA-D originales. Esta retención de la heterogeneidad subraya la naturaleza compleja de estas poblaciones celulares y aumenta el valor de las células CDNR4 en la investigación centrada en la diferenciación celular y la progresión del cáncer.

Pañuelo de papel
Pecho
Enfermedad
Adenocarcinoma

02Clasificación

Organismo
Ratón
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Identificadores

Referencia
CDNR4 (número de catálogo de Cytion 400391)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5719

04Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
Se recomienda 2 x 104 células/cm2.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

06Donante

Edad del donante
1 año