Ga naar de inhoud
CDNR4
Weefsel
Borst
Ziekte
Adenocarcinoom

Documenten

CDNR4

Cell line · Productnummer 400391

The CDNR4 cell line comprises a specialized subset originating from the COMMA-D cell line, known for modeling mouse mammary carcinoma. This clonal subpopu...

€800.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De CDNR4-cellijn bestaat uit een gespecialiseerde subset afkomstig van de COMMA-D-cellijn, die bekend staat om het modelleren van mammacarcinoom bij muizen. Deze klonale subpopulatie is uitgebreid gekarakteriseerd, waarbij een reeks unieke eigenschappen en functionaliteiten aan het licht zijn gekomen. Een van de meest opvallende kenmerken van CDNR4 cellen is hun gelijkenis met borststamcellen, waardoor ze een belangrijke bron zijn voor het onderzoeken van aspecten van stamcelbiologie, carcinogenese en cellulaire heterogeniteit binnen populaties. Deze cellen werden ontwikkeld door transfectie van een transposon met kanamycine- en neomycineresistentiegenen (Tn5-gen), wat leidde tot het ontstaan van verschillende intrigerende eigenschappen en mogelijkheden, waaronder hun vermogen om te differentiëren in zowel preneoplastische als neoplastische fenotypen.

CDNR4 is afkomstig van de COMMA-D lijn, die aanvankelijk werd bestudeerd op cellulaire heterogeniteit met behulp van verschillende technieken zoals fasecontrastmicroscopie, immunocytochemische kleuring, DNA-gehalteanalyse en evaluaties van oncogeen potentieel. Door middel van specifieke transfectie- en selectiemethoden werden klonale subpopulaties zoals CDNR4 geïsoleerd, die elk een mate van heterogeniteit behielden zoals gezien in de oorspronkelijke COMMA-D oudercellen. Dit behoud van heterogeniteit onderstreept de complexe aard van deze celpopulaties en vergroot de waarde van CDNR4-cellen in onderzoek gericht op celdifferentiatie en kankerprogressie.

Weefsel
Borst
Ziekte
Adenocarcinoom

02Classificatie

Organisme
Muis
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Identificatiegegevens

Bronvermelding
CDNR4 (Cytion catalogusnummer 400391)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_5719

04Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
2 x 104 cellen/cm2 wordt aanbevolen
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 5 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

06Donateur

Leeftijd van de donor
1 jaar