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H4-II-E-C3
Tissu
Foie
Maladie
Carcinome hépatocellulaire
Synonymes
H4IIEC3, H4-IIE-C3, H4-II-EC3, H-II-E-C3

Documents

H4-II-E-C3

Cell line · Référence du produit 305336

The H4-II-E-C3 cell line is a well-established rat hepatoma cell line derived from liver carcinoma. This line is widely used in research focused on liver-...

€550.00hors taxes et frais de port
En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire H4-II-E-C3 est une lignée bien établie d'hépatomes de rat dérivée d'un carcinome hépatique. Cette lignée est largement utilisée dans la recherche axée sur les fonctions spécifiques du foie et les processus métaboliques qui se déroulent au sein des hépatocytes. L'une des caractéristiques notables des cellules H4-II-E-C3 est leur forte expression du transporteur de glutamate à haute affinité GLT-1A. Cette particularité les distingue des hépatocytes normaux de rat, qui ne présentent pas de niveaux significatifs de ce transporteur. L'expression de GLT-1A dans les cellules H4-II-E-C3 permet d'étudier efficacement le métabolisme et le transport du glutamate, apportant ainsi des éclaircissements sur la transformation des cellules hépatiques et le métabolisme des cellules tumorales.

De plus, les cellules H4-II-E-C3 sont utilisées pour étudier le métabolisme des aldéhydes, en particulier l’activité de l’aldéhyde déshydrogénase mitochondriale de classe 2 (ALDH2). Cette enzyme joue un rôle essentiel dans le métabolisme de l’acétaldéhyde produit lors de l’oxydation de l’éthanol, ce qui rend cette lignée cellulaire adaptée à la recherche sur le métabolisme de l’alcool et ses effets cellulaires. L’utilisation d’une technique dite de « clamp à l’acétaldéhyde » sur ces cellules a permis de mesurer avec précision l’activité de l’ALDH2 sans avoir à isoler les mitochondries, facilitant ainsi l’étude de la cinétique enzymatique et de l’impact de divers inhibiteurs sur la détoxification des aldéhydes.

Tissu
Foie
Maladie
Carcinome hépatocellulaire
Synonymes
  • H4IIEC3
  • H4-IIE-C3
  • H4-II-EC3
  • H-II-E-C3

02Classification

Organisme
Rat
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
GMO-S1
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S1: This rat hepatocellular carcinoma cell line (H4-II-E-C3) contains undefined modifications classified as GMO, stably present in the transformed hepatic cell line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Tumorigène
Oui, chez les rats AxC

04Identifiants

Référence
H4-II-E-C3 (référence Cytion 305336)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0285

05Expression et sensibilité

Expression des protéines
Expression génique : tyrosine aminotransférase, albumine, transferrine, prothrombine

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
1-3 × 10⁴/cm²
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Race / sous-espèce
AxC
Âge du donneur
Non spécifié