Ga naar de inhoud
H4-II-E-C3
Weefsel
Lever
Ziekte
Hepatocellulair carcinoom
Synoniemen
H4IIEC3, H4-IIE-C3, H4-II-EC3, H-II-E-C3

Documenten

H4-II-E-C3

Cell line · Productnummer 305336

The H4-II-E-C3 cell line is a well-established rat hepatoma cell line derived from liver carcinoma. This line is widely used in research focused on liver-...

€550.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De H4-II-E-C3-cellijn is een algemeen erkende hepatomacellijn van de rat, afkomstig van levercarcinoom. Deze cellijn wordt op grote schaal gebruikt in onderzoek naar leverspecifieke functies en de metabolische processen die plaatsvinden in hepatocyten. Een opvallend kenmerk van H4-II-E-C3-cellen is hun hoge expressie van de glutamaattransporter GLT-1A met hoge affiniteit. Deze eigenschap onderscheidt ze van normale hepatocyten van ratten, die geen significante hoeveelheden van deze transporter vertonen. De expressie van GLT-1A in H4-II-E-C3-cellen maakt een efficiënt onderzoek naar het glutamaatmetabolisme en -transport mogelijk, wat inzicht verschaft in de transformatie van levercellen en het metabolisme van tumorcellen.

Daarnaast worden H4-II-E-C3-cellen gebruikt voor onderzoek naar het aldehydemetabolisme, met name de activiteit van het mitochondriale klasse 2-aldehyde-dehydrogenase (ALDH2). Dit enzym is cruciaal voor het metaboliseren van aceetaldehyde dat vrijkomt bij de oxidatie van ethanol, waardoor deze cellijn geschikt is voor onderzoek naar het alcoholmetabolisme en de cellulaire effecten daarvan. Door het gebruik van een „acetaldehyde-clamp“-techniek in deze cellen kon de ALDH2-activiteit nauwkeurig worden gemeten zonder dat mitochondriën hoefden te worden geïsoleerd, wat het onderzoek naar de enzymkinetiek en de invloed van verschillende remmers op de ontgifting van aldehyden vergemakkelijkt.

Weefsel
Lever
Ziekte
Hepatocellulair carcinoom
Synoniemen
  • H4IIEC3
  • H4-IIE-C3
  • H4-II-EC3
  • H-II-E-C3

02Classificatie

Organisme
Rat
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This rat hepatocellular carcinoma cell line (H4-II-E-C3) contains undefined modifications classified as GMO, stably present in the transformed hepatic cell line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Tumorverwekkend
Ja, bij AxC-ratten

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
H4-II-E-C3 (Cytion-catalogusnummer 305336)
NCBI-belastingnummer
10116
Cellosaurus
CVCL_0285

05Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie
Genexpressie: tyrosineaminotransferase, albumine, transferrine, protrombine

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1-3*10⁴/cm²
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
AxC
Leeftijd van de donor
Ongespecificeerd