Gå direkte til indholdet
H4-II-E-C3
Væv
Lever
Sygdom
Hepatocellulært karcinom
Synonymer
H4IIEC3, H4-IIE-C3, H4-II-EC3, H-II-E-C3

Dokumenter

H4-II-E-C3

Cell line · Varenummer 305336

The H4-II-E-C3 cell line is a well-established rat hepatoma cell line derived from liver carcinoma. This line is widely used in research focused on liver-...

€550.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

H4-II-E-C3-cellelinjen er en veletableret hepatomcellelinje fra rotter, der stammer fra leverkarcinom. Denne linje anvendes i vid udstrækning i forskning med fokus på leverspecifikke funktioner og de metaboliske processer, der finder sted i hepatocytterne. Et bemærkelsesværdigt aspekt ved H4-II-E-C3-celler er deres høje ekspression af glutamattransportøren GLT-1A med høj affinitet. Denne egenskab adskiller dem fra normale rottehepatocytter, som ikke udviser signifikante niveauer af denne transportør. Ekspressionen af GLT-1A i H4-II-E-C3-celler muliggør en effektiv undersøgelse af glutamatmetabolisme og -transport, hvilket giver indsigt i levercellers transformation og tumorcellers metabolisme.

Derudover anvendes H4-II-E-C3-celler til at undersøge aldehydmetabolismen, især aktiviteten af mitokondrie-klasse-2-aldehyddehydrogenase (ALDH2). Dette enzym er afgørende for metaboliseringen af acetaldehyd, der dannes under ethanoloxidation, hvilket gør denne cellelinje velegnet til forskning i alkoholmetabolisme og dens cellulære effekter. Anvendelsen af en »acetaldehyd-clamp«-teknik i disse celler har gjort det muligt at foretage præcise målinger af ALDH2-aktiviteten uden behov for isolering af mitokondrier, hvilket letter undersøgelsen af enzymkinetikken og virkningen af forskellige hæmmere på aldehydafgiftningen.

Væv
Lever
Sygdom
Hepatocellulært karcinom
Synonymer
  • H4IIEC3
  • H4-IIE-C3
  • H4-II-EC3
  • H-II-E-C3

02Klassificering

Organisme
Rotte
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This rat hepatocellular carcinoma cell line (H4-II-E-C3) contains undefined modifications classified as GMO, stably present in the transformed hepatic cell line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Tumorfremkaldende
Ja, hos AxC-rotter

04Identifikatorer

Kildehenvisning
H4-II-E-C3 (Cytion-katalognummer 305336)
NCBI-skattenummer
10116
Cellosaurus
CVCL_0285

05Udtryk og modtagelighed

Proteinekspression
Genekspression: tyrosinaminotransferase, albumin, transferrin, protrombin

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1–3 × 10⁴/cm²
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Race / underart
AxC
Donorens alder
Uspecificeret