Preskoči na vsebino
H4-II-E-C3
Tkivo
Jetra
Bolezen
Hepatocelularni karcinom
Sinonimi
H4IIEC3, H4-IIE-C3, H4-II-EC3, H-II-E-C3

Dokumenti

H4-II-E-C3

Cell line · Številka izdelka 305336

The H4-II-E-C3 cell line is a well-established rat hepatoma cell line derived from liver carcinoma. This line is widely used in research focused on liver-...

€550.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija H4-II-E-C3 je uveljavljena celična linija hepatoma podgan, pridobljena iz jetrnega karcinoma. Ta linija se pogosto uporablja v raziskavah, osredotočenih na funkcije, značilne za jetra, ter na presnovne procese, ki potekajo znotraj hepatocitov. Ena od pomembnih lastnosti celic H4-II-E-C3 je njihova visoka ekspresija visokoafinitnega transporterja glutamata GLT-1A. Ta lastnost jih loči od normalnih hepatocitov podgan, ki ne kažejo znatnih ravni tega transporterja. Ekspresija GLT-1A v celicah H4-II-E-C3 omogoča učinkovito preučevanje presnove in transporta glutamata, kar ponuja vpogled v transformacijo jetrnih celic in presnovo tumorskih celic.

Poleg tega se celice H4-II-E-C3 uporabljajo za preučevanje metabolizma aldehidov, zlasti aktivnosti mitohondrijske aldehiddehidrogenaze razreda 2 (ALDH2). Ta encim je ključen za presnovo acetaldehida, ki nastaja med oksidacijo etanola, zaradi česar je ta celična linija primerna za raziskave metabolizma alkohola in njegovih celičnih učinkov. Uporaba tehnike »acetaldehidnega klampa« v teh celicah je omogočila natančno merjenje aktivnosti ALDH2 brez potrebe po izolaciji mitohondrijev, kar olajšuje preučevanje encimske kinetike in vpliva različnih zaviralcev na detoksifikacijo aldehidov.

Tkivo
Jetra
Bolezen
Hepatocelularni karcinom
Sinonimi
  • H4IIEC3
  • H4-IIE-C3
  • H4-II-EC3
  • H-II-E-C3

02Razvrstitev

Organizem
Podgana
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This rat hepatocellular carcinoma cell line (H4-II-E-C3) contains undefined modifications classified as GMO, stably present in the transformed hepatic cell line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Tumorigeničen
Da, pri podganah AxC

04Identifikatorji

Navajanje vira
H4-II-E-C3 (kataloška številka Cytion 305336)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0285

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija beljakovin
Ekspresija genov: tirozinaminotransferaza, albumin, transferin, protrombin

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1–3 × 10⁴/cm²
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Pasma / podvrsta
AxC
Starost darovalca
Neopredeljeno