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H4-II-E-C3
Tessuto
Fegato
Malattia
Carcinoma epatocellulare
Sinonimi
H4IIEC3, H4-IIE-C3, H4-II-EC3, H-II-E-C3

Documenti

H4-II-E-C3

Cell line · Codice prodotto 305336

The H4-II-E-C3 cell line is a well-established rat hepatoma cell line derived from liver carcinoma. This line is widely used in research focused on liver-...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare H4-II-E-C3 è una linea cellulare di epatoma di ratto ben consolidata, derivata da un carcinoma epatico. Questa linea è ampiamente utilizzata nella ricerca incentrata sulle funzioni specifiche del fegato e sui processi metabolici che avvengono all’interno degli epatociti. Un aspetto degno di nota delle cellule H4-II-E-C3 è la loro elevata espressione del trasportatore di glutammato ad alta affinità GLT-1A. Questa caratteristica le distingue dagli epatociti normali di ratto, che non presentano livelli significativi di questo trasportatore. L’espressione di GLT-1A nelle cellule H4-II-E-C3 consente di studiare in modo efficiente il metabolismo e il trasporto del glutammato, fornendo approfondimenti sulla trasformazione delle cellule epatiche e sul metabolismo delle cellule tumorali.

Inoltre, le cellule H4-II-E-C3 vengono utilizzate per studiare il metabolismo delle aldeidi, in particolare l’attività dell’aldeide deidrogenasi mitocondriale di classe 2 (ALDH2). Questo enzima è fondamentale per il metabolismo dell’acetaldeide prodotta durante l’ossidazione dell’etanolo, rendendo questa linea cellulare adatta alla ricerca sul metabolismo dell’alcol e sui suoi effetti cellulari. L’uso della tecnica del “clamp dell’acetaldeide” su queste cellule ha consentito di misurare con precisione l’attività dell’ALDH2 senza la necessità di isolare i mitocondri, facilitando lo studio della cinetica enzimatica e dell’impatto di vari inibitori sulla detossificazione delle aldeidi.

Tessuto
Fegato
Malattia
Carcinoma epatocellulare
Sinonimi
  • H4IIEC3
  • H4-IIE-C3
  • H4-II-EC3
  • H-II-E-C3

02Classificazione

Organismo
Ratto
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This rat hepatocellular carcinoma cell line (H4-II-E-C3) contains undefined modifications classified as GMO, stably present in the transformed hepatic cell line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Tumorigenico
Sì, nei ratti AxC

04Identificatori

Riferimento bibliografico
H4-II-E-C3 (codice catalogo Cytion 305336)
Codice fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0285

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
Espressione genica: tirosina aminotransferasi, albumina, transferrina, protrombina

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1-3*10^4/cm²
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Razza / sottospecie
AxC
Età dei donatori
Non specificato