Přejít na obsah
H4-II-E-C3
Tkáň
Játra
Nemoc
Hepatocelulární karcinom
Synonyma
H4IIEC3, H4-IIE-C3, H4-II-EC3, H-II-E-C3

Dokumenty

H4-II-E-C3

Cell line · Číslo výrobku 305336

The H4-II-E-C3 cell line is a well-established rat hepatoma cell line derived from liver carcinoma. This line is widely used in research focused on liver-...

€550.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie H4-II-E-C3 je dobře zavedená buněčná linie hepatomu krysy odvozená z karcinomu jater. Tato linie se široce využívá ve výzkumu zaměřeném na funkce specifické pro játra a metabolické procesy probíhající v hepatocytech. Jedním z pozoruhodných aspektů buněk H4-II-E-C3 je jejich vysoká exprese glutamátového transportéru s vysokou afinitou GLT-1A. Tato vlastnost je odlišuje od normálních hepatocytů potkana, které nevykazují významné hladiny tohoto transportéru. Exprese GLT-1A v buňkách H4-II-E-C3 umožňuje efektivní studium metabolismu a transportu glutamátu, čímž poskytuje poznatky o transformaci jaterních buněk a metabolismu nádorových buněk.

Kromě toho se buňky H4-II-E-C3 používají ke studiu metabolismu aldehydů, zejména aktivity mitochondriální aldehyddehydrogenázy třídy 2 (ALDH2). Tento enzym je klíčový pro metabolizaci acetaldehydu vznikajícího při oxidaci etanolu, díky čemuž je tato buněčná linie vhodná pro výzkum metabolismu alkoholu a jeho buněčných účinků. Použití techniky „acetaldehydového clampu“ u těchto buněk umožnilo přesné měření aktivity ALDH2 bez nutnosti izolace mitochondrií, což usnadňuje studium kinetiky enzymu a vlivu různých inhibitorů na detoxikaci aldehydů.

Tkáň
Játra
Nemoc
Hepatocelulární karcinom
Synonyma
  • H4IIEC3
  • H4-IIE-C3
  • H4-II-EC3
  • H-II-E-C3

02Klasifikace

Organismus
Krysa
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This rat hepatocellular carcinoma cell line (H4-II-E-C3) contains undefined modifications classified as GMO, stably present in the transformed hepatic cell line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Tumorogenní
Ano, u potkanů AxC

04Identifikátory

Citace
H4-II-E-C3 (katalogové číslo Cytion 305336)
Daňové identifikační číslo NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0285

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
Exprese genů: tyrosinaminotransferáza, albumin, transferin, protrombin

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1–3 × 10⁴/cm²
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
AxC
Věk dárce
Nespecifikováno